(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211120237.4 (22)申请日 2022.09.15 (71)申请人 杭州市中 医院 地址 310000 浙江省杭州市西湖区体 育场 路453号 (72)发明人 张育　任兴昌　陈洪勋　王凤林　 王圣凯　 (74)专利代理 机构 杭州浙科专利事务所(普通 合伙) 33213 专利代理师 周红芳 (51)Int.Cl. G01N 1/28(2006.01) (54)发明名称 高分子絮凝法沉积细胞蜡 块的制作方法 (57)摘要 本发明公开了高分子絮凝法沉积细胞蜡块 的制作方法， 它包括如下步骤： 1)将离体液体标 本中加入高分子絮凝剂， 静置10 ‑60min， 倾去上 层清液， 得到含凝聚物的液体； 2)将含凝聚物的 液体转于离心管中于进行离心沉降， 得到凝聚 物； 3)将凝聚物经脱水、 包埋得到细胞蜡块， 所得 细胞蜡块用于HE切片、 特殊染色、 免疫组化或分 子检测。 本发 明采用限定量的无机高分子絮凝剂 白色聚合氯化铝处理液体标本， 得到有效的细胞 凝聚物， 与未加PA C离心沉积的原有方法相比， 沉 积物的量多， 细胞 成分多， 不容易散开， 为病理诊 断及后续有关研究工作和临床运用提供了必要 的保证， 对运用相应技术的研究及对临床制定、 选择治疗方案提供了更强的可靠性。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115406737 A 2022.11.29 CN 115406737 A 1.高分子絮凝法沉积细胞蜡 块的制作方法， 其特 征在于包括如下步骤： 1)将离体液体标本中加入高分子絮凝剂， 静置10 ‑60min， 倾去上层清液， 得到含凝聚物 的液体； 2)将步骤1)得到的含凝聚物的液体转于离心管中于3000转/min转速下进行离心沉降 10‑20min， 得到凝聚物； 3)将步骤2)得到的凝聚物经脱水、 包埋得到细胞蜡 块。 2.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在于高分子 絮凝剂为白色聚合氯化铝水 溶液， 其质量浓度为0.1 ‑15％， 优选为5 ‑10％。 3.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在于高分子 絮凝剂与液体标本的投料体积比为1:40 0‑666， 优选为1： 40 0。 4.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在于液体标 本浓度低时， 先离心， 倾去上层清液， 再加液体标本， 离心， 依次重复操作3 ‑10次。 5.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在于液体标 本加入高分子絮凝剂前进 行预处理， 具体过程为： 液体标本中加入40％甲醛溶液， 混合均匀 后静置20 ‑60min， 优选静置时间为3 0min。 6.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡 块的制作方法， 其特征在于液体标本加液体牛 血清白蛋白。 7.根据权利要求1所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在于步骤2) 得到的凝聚物中加入95％的酒精进行固定2 ‑4h， 所述95％的酒精与凝聚物的质量比为5 ‑ 10:1。 8.根据权利要求1 ‑7任一项所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在 于液体标本包括胸水、 腹水、 脑脊液或尿液。 9.根据权利要求1 ‑7任一项所述的高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 其特征在 于所得细胞蜡 块用于HE切片、 特殊染色、 免疫组化或分子检测。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115406737 A 2高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方 法 技术领域 [0001]本发明属于病理学技术领域， 涉及一种高分子絮凝法沉积细胞蜡块的制作方法， 具体为采用高分子絮凝法制备医学 试剂沉积细胞蜡 块的方法。 背景技术 [0002]病理科经常用患者离体体液做细胞学检查， 离体体液包括胸水、 腹水、 尿液等， 如 将离体体液做细胞学涂片或石蜡切片， 用于显微镜下观察。 目前， 病理科的医务人员常用 50mL或10mL的离心管， 取样 离心处理， 但是离心 沉积有效成分较少， 不能得到足够 多的细胞 做进一步的分析。 而且传统方法制作细胞蜡块时， 因为取材、 脱 水、 包埋时等 都容易碎裂， 细 胞蜡块制备失败， 所以常常导致临床送来很多离体体液做了病理检查， 但是却得不到非常 明确的诊断， 影响临床下一步治疗。 为此， 研究一种能有效将送检体液中的细胞成分凝聚下 来， 方便做细胞学涂片并制作成不易碎裂的细胞蜡块， 为后续进行进行免疫组化及分子病 理检查提供充足的细胞量和保留一定的排列结构， 提高体液病理学检查的准确 性， 显得尤 其重要。 发明内容 [0003]针对现有技术中存在的上述问题， 本发明的目的在于提供一种高分子絮凝法沉积 细胞蜡块的制作方法， 即采用高分子絮凝法制备医学试剂沉积细胞蜡块， 能有效将送检体 液中的细胞成分凝聚下来， 制作成不易碎裂的细胞蜡块， 为后续进行进行免疫组化及分子 病理检查 提供充足的细胞量和保留一定的排列结构， 提高体液病理学检查的准确性。 [0004]本发明限定的高分子絮凝法沉积细胞蜡 块的制作方法， 包括如下步骤： [0005]1)将离体液体标本中加入高分子絮凝剂， 静置 10‑60min， 倾去上层清 液， 得到含凝 聚物的液体； [0006]2)将步骤1)得到的含凝聚物的液体转于离心管中于3000转/min转速下进行离心 沉降10‑20min， 得到凝聚物； [0007]3)将步骤2)得到的凝聚物经脱水、 包埋得到细胞蜡 块。 [0008]进一步地， 本发明还限定了高分子絮凝剂为白色聚合氯化铝水溶液(记为PAC， 下 同)， 其质量浓度为0.1 ‑15％， 优选为5 ‑10％。 [0009]进一步地， 本 发明还限定了高分子絮凝剂与液体标本的投料体积比为1: 400‑666， 优选为1： 40 0。 [0010]进一步地， 本发明还限定了液体标本浓度低时， 先离心， 倾去上层清液， 再加液体 标本， 离心， 依次重复操作3 ‑10次， 如此操作可以提高液体标本的浓度， 便 于后续操作。 [0011]进一步地， 本发明还限定了液体标本加入高分子絮凝剂前进行预处理， 具体过程 为： 液体标本中加入40％甲醛溶液， 混合均匀 后静置20 ‑60min， 优选 静置时间为30min， 本发 明通过在凝聚处理前使用甲醛固定， 既可保存细胞形态， 又可杀灭其中的病原体， 尚不会导 致蛋白质凝聚影响细胞等成分有效聚集。说　明　书 1/4 页 3 CN 115406737 A 3