(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210553090.1 (22)申请日 2022.05.20 (71)申请人 微康益生菌 （苏州） 股份有限公司 地址 215200 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区龙桥路10 33号 (72)发明人 方曙光　陈珂可　冯胜鹏　严涛　 杨恒飞　程文　吴嘉宝　 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 陈小龙 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 11/096(2020.01) A61K 9/50(2006.01) A61K 35/741(2015.01)A61K 47/46(2006.01) A61K 47/34(2017.01) A61P 1/00(2006.01) A23C 9/123(2006.01) A23L 33/135(2016.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/46(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/245(2006.01) C12R 1/23(2006.01) (54)发明名称 一种提高菌种贮存稳定性的益生菌剂及其 制备方法与应用 (57)摘要 本发明提供了一种提高菌种贮存稳定性的 益生菌剂及其制备方法与应用， 所述提高菌种贮 存稳定性的益生菌剂的制备原料包括益生菌、 保 护剂和包埋剂； 所述保护剂 包括灭活乳酸菌和细 胞膜稳态剂； 所述细胞膜稳态剂 包括硒代半胱氨 酸、 甲硫氨酸、 甘露醇或磷脂酰丝氨酸中的任意 一种或至少两种的组合； 所述包埋剂包括聚乳 酸‑羟基乙酸共聚物。 所述保护剂重点为保护益 生菌细胞内源性稳态， 包埋剂是为形成微囊结 构， 隔绝不利的外源性条件， 进 一步保护益生菌， 提高其贮存稳定性。 相较于现有技术而言， 本发 明方案提高菌种贮存 稳定性的效果更好， 不仅适 用于乳酸菌等常见益生菌， 还适用于阿克曼氏菌 等严格厌氧类 菌种， 具有重要的应用价 值。 权利要求书2页 说明书9页 CN 114806965 A 2022.07.29 CN 114806965 A 1.一种提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述提高菌种贮存稳定性的益 生菌剂的制备原料包括 益生菌、 保护剂和包埋剂； 所述保护剂包括灭活乳酸菌和细胞膜稳态剂； 所述细胞膜稳态剂包括硒代半胱氨酸、 甲硫氨酸、 甘露醇、 海藻糖、 脱脂乳粉或磷脂酰 丝氨酸中的任意 一种或至少两种的组合； 所述包埋剂包括聚乳酸 ‑羟基乙酸共聚物。 2.如权利要求1所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述保护剂以重 量份数计包括灭活乳酸菌10 ‑70份和细胞膜稳态剂1 ‑5份； 优选地， 所述细胞膜稳态剂包括硒代半胱氨酸和甘露醇； 优选地， 所述硒代半胱氨酸与甘露醇的质量比为(0.01 ‑1):(1‑5)， 优选为0.1:(2.5 ‑ 5.5)。 3.如权利要求1或2所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述益生菌 包括乳酸菌、 阿克 曼氏菌、 脆弱拟杆菌或柔嫩 梭菌中的任意 一种或至少两种的组合。 4.如权利要求3所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 在所述益生菌 中， 所述乳酸菌包括乳杆菌属的乳酸菌、 双 歧杆菌属的乳酸菌、 链球菌属的乳酸菌、 肠球菌 属的乳酸菌、 乳球菌属的乳酸菌或片球菌属的乳酸菌中的任意 一种或至少两种的组合。 5.如权利要求1 ‑4中任一项所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述 灭活乳酸菌包括 灭活乳杆菌属的乳酸菌、 灭活链球菌属的乳酸菌、 灭活肠球菌属的乳酸菌、 灭活乳球菌属的乳酸菌或灭活片球菌属的乳酸菌中的任意 一种或至少两种的组合。 6.如权利要求4或5所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述乳杆菌 属的乳酸菌包括植物乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌、 干酪乳杆菌、 副干酪乳杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 嗜 酸乳杆菌、 德式乳杆菌、 唾液乳杆菌、 发酵乳杆菌、 格氏乳杆菌或约氏乳杆菌中的任意一种 或至少两种的组合； 优选地， 所述链球菌属的乳酸菌包括嗜热链球菌； 优选地， 所述肠球菌属的乳酸菌包括粪肠球菌； 优选地， 所述乳球菌属的乳酸菌包括乳酸乳球菌； 优选地， 所述片球菌属的乳酸菌包括乳酸片球菌和/或戊糖片球菌 。 7.如权利要求4所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂， 其特征在于， 所述双歧杆菌属 的乳酸菌包括乳双 歧杆菌、 长双 歧杆菌、 短双 歧杆菌、 青春双 歧杆菌、 婴儿双 歧杆菌或两歧 双歧杆菌中的任意 一种或至少两种的组合。 8.一种如权利要求1 ‑7中任一项所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂的制备方法， 其特征在于， 所述制备 方法包括如下步骤： (1)培养益生菌， 收集菌体； (2)将保护剂与菌体混合， 得到活性混合物； (3)利用包埋剂对活性混合物进行乳化包埋， 得乳化液， 冻干， 即得。 9.如权利要求8所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂的制备方法， 其特征在于， 步骤 (1)所述培 养在30‑42℃下进行， 所述培 养的时间为10 ‑24h； 优选地， 步骤(1)所述收集菌体的方式包括离心和/或膜过 滤； 优选地， 步骤(2)所述混合的温度不超过20℃， 所述混合的时间为10 ‑30min；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114806965 A 2优选地， 步骤(2)中， 所述菌体与保护剂的质量比为1:(0.1 ‑1.5)； 优选地， 步骤(3)中， 所述包埋剂的量占加入后体系 总质量的0.1％ ‑10％； 优选地， 步骤(3)中， 所述乳化包埋采用膜分离 工艺。 10.一种如权利要求1 ‑7中任一项所述的提高菌种贮存稳定性的益生菌剂在制备食 品、 保健品或药品中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114806965 A 3