(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210562223.1 (22)申请日 2022.05.23 (71)申请人 同济大学 地址 200092 上海市杨 浦区四平路1239号 (72)发明人 谢丽　张艺蝶　向远昆　于雪梅　 李佳璐　马一可　何莹莹　黄霞　 (74)专利代理 机构 北京汇捷知识产权代理事务 所(普通合伙) 11531 专利代理师 李俊华 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C05F 17/20(2020.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/065(2006.01) C12R 1/38(2006.01)C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复 合菌剂及其制备方法 (57)摘要 本发明提供了一种促进好氧堆肥快速升温 减容固氮的复合菌剂,包括枯草芽孢杆菌30 ‑40 份、 褐球固氮 菌10‑20份、 堆肥假单胞菌10 ‑20份、 热普通链霉菌20 ‑40份。 本发明基于城乡混合有 机垃圾的特点， 具有促进好氧堆肥快速升温、 减 容固氮的能力， 可有效地应用于复合菌剂强化城 乡有机垃圾好氧堆肥中， 能够缩短堆肥升温期、 延长高温期、 增加堆肥后堆体减重率、 减少氮素 损失， 明显加快堆肥快速稳定， 实现高温增效和 减容固氮作用的功能性菌剂， 适合于规模化应 用， 解决了目前好氧堆肥技术存在的堆肥周期 长、 氮素损失等问题。 权利要求书1页 说明书6页 CN 115161220 A 2022.10.11 CN 115161220 A 1.一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂， 其特征在于， 包括枯草芽孢杆菌 30‑40份、 褐球固氮菌10 ‑20份、 堆肥假单 胞菌10‑20份、 热普通链霉菌20 ‑40份。 2.根据权利要求1所述的一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的制备方 法， 其特征在于： 步骤1)： 菌株斜面培养： 将枯草芽孢杆菌菌种、 褐球固氮菌、 堆肥假单胞菌菌种、 热普通 链霉菌种分别接种在斜 面培养基中培 养， 分别得到对应菌株的斜 面菌种； 步骤2)： 菌株子液培养： 分别将步骤1)得到的四种斜面培养菌株分别接种到装有液体 培养基的无菌三角烧瓶中进行 单独培养， 分别得到对应的菌液； 步骤3)： 复合菌剂制备： 将所述 步骤2)所 得菌株子液按比例混合， 得到液体复合菌剂。 3.根据权利要求1所述的一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的制备方 法， 其特征在于， 所述步骤1)中枯草芽孢杆菌使用的为斜面培养基为胰蛋白胨大豆琼脂培 养基， 30℃下培养2 ‑3d； 堆肥假单胞菌使用的为胰蛋白胨大豆琼脂培养基， 28℃下培养2 ‑ 3d； 褐球固氮菌使用的为固氮菌培养基， 50℃下培养7d； 热普通链霉菌使用的为乳酸菌培养 基(Ⅱ)， 28℃下培 养2‑3d。 4.根据权利要求3所述的一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的制备方 法， 其特征在于， 所述步骤2)中枯草芽孢杆菌使用的液体培养基为： 胰蛋白胨1％、 酵母提取 物0.5％、 氯化钠 1％， 用2moL/L氢氧化钠调节pH在7.2 ‑7.4之间； 褐球固氮菌使用的液体培 养基为： 胰蛋白胨1.5％、 大豆胨0.5％、 氯化钠0.5％， 用2moL/L氢氧化钠调节pH在7.1 ‑7.5 之间； 褐球固氮菌使用的液体培养基为： 甘露醇2％、 磷酸二氢钾0.02％、 磷酸氢钾0.08％、 七水硫酸镁0.02 ％、 二水硫酸钙0.02 ％、 酵母粉0.05％、 二水钼酸钠(微量)、 六水三氯化铁 (微量)， 用2moL/L氢氧化钠和2moL/L盐酸调节pH在7.2 ‑7.4之间； 热普通链霉菌使用的液体 培养基为： 大豆粉2％、 硫酸铵0.6％、 蛋白胨0.3％、 葡萄糖2％、 酵母粉0.6％、 氯化钠0.2％、 磷酸二氢钾0.0 6％、 碳酸钙0.2％。 5.根据权利要求3所述的一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的制备方 法， 其特征在于， 所述步骤2)中， 将初步制得的复合菌液以质量比为5 ‰的接种量接种于质 量比为厨余垃圾40％ ‑70％、 尾菜20％ ‑30％、 果皮10％ ‑15％、 秸秆5％ ‑10％、 锯末5 ‑10％， 粒径≤20mm混合堆肥原料中， 控制混合料碳氮比为20:1 ‑30:1， 有机质含量为75％ ‑85％、 含 水率为50％‑70％、 pH为 4‑6。 6.根据权利要求3所述的促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂， 其特征在于， 所 述步骤3)中， 促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的接种 量为5‰， 发酵温度在 ‑10 ℃‑10℃可正常作用， 促进堆体快速升温的同时减少体积， 提高堆肥产品氮元素含量， 实现 城乡混合有机垃圾快速稳定化。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161220 A 2一种促进好氧堆肥快速 升温减容固氮的 复合菌剂及其制备 方法 技术领域 [0001]本发明涉及 一种微生物菌剂， 特别涉及一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的微 生物菌剂及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、 饮食服务、 单位供餐等活动中产生的垃 圾， 具有高含水率、 高有机物、 高油脂、 高盐分的特征， 未妥善处理极易腐烂， 易滋长病原微 生物、 霉菌毒素等有害物质。  2020年， 我国厨余垃圾年产量已达1.16亿吨， 将厨余垃圾转化 成可利用资源， 实现资源化循环利用成为我国所面临的重大问题。 [0003]目前， 厨余垃圾的处理方式主要有填埋、 焚烧、 厌氧发酵、 好氧堆肥、 生物转化等技 术。 填埋和焚烧存在资源回收利用率低、 易造成二次污染等问题； 厌氧发酵和生物转化对技 术设备和资金投入要求较高， 目前难以大面积推广。 [0004]好氧堆肥是一种实现厨余垃圾资源再生利用的有效途径， 但是传统好氧堆肥存在 堆肥初期升温缓慢、 高温期持续时间短、 有机质未被大量分解、 堆体减容不显著和脱水率 低、 氮素损失高达30 ‑50％、 臭气污染严重、 腐熟度低等 问题。 近年来， 新颖的复合菌剂好氧 堆肥工艺能够促使堆体温度在不依赖外加热源的条件快速升高， 有效缓解上述问题， 得到 众多关注。 与普通堆肥相比， 复合菌剂强化好氧堆肥在促进有机物降解、 加速堆肥腐熟进 程、 增强减容固氮能力等方面有明显优势。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种能解决目前好氧堆肥技术存在的堆肥周期长、 氮素损失 等问题， 具有促进好氧堆肥快速升温、 减容固氮的能力， 可有效地应用于复合菌剂强化城乡 有机垃圾好氧堆肥中， 能够缩短堆肥升温期、 延长高温期、 增加堆肥后堆体减重率、 减少氮 素损失， 明显加快堆肥 快速稳定， 适 合于规模化应用的一种复合菌剂。 [0006]为了实现上述目的， 本发明采用了如下技 术方案： [0007]一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂， 其特征在于， 包括枯草芽孢杆 菌30‑40份、 褐球固氮菌10 ‑20份、 堆肥假单 胞菌10‑20 份、 热普通链霉菌20 ‑40份。 [0008]本发明还提供了一种促进好氧堆肥快速升温减容固氮的复合菌剂的制备方法， 其 特征在于： [0009]步骤1)： 菌株斜面培养： 将枯草芽孢杆菌菌种、 褐球固氮菌、 堆肥假单胞菌菌种、 热 普通链霉菌种分别接种在斜 面培养基中培 养， 分别得到对应菌株的斜 面菌种； [0010]步骤2)： 菌株子液培养： 分别将步骤1)得到的四种斜面培养菌株分别接种到装有 液体培养基的无菌三角烧瓶中进行 单独培养， 分别得到对应的菌液； [0011]步骤3)： 复合菌剂制备： 将所述步骤2)所得菌株子液按比例混合， 得到液体复合菌 剂。说　明　书 1/6 页 3 CN 115161220 A 3