(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210597863.6 (22)申请日 2022.05.24 (83)生物保 藏信息 CCTCC M 2021 1529 2021.12.0 3 (71)申请人 武汉轻工大 学 地址 430000 湖北省武汉市汉口常青花园 学府南路68号 (72)发明人 王璋倩　杨锐　高超　丛欣　何毅　 程水源　董星星　王沫　 (74)专利代理 机构 深圳市世纪恒程知识产权代 理事务所 4 4287 专利代理师 郭子氚 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 9/26(2006.01)C12N 9/42(2006.01) C12N 9/50(2006.01) C12P 3/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种高山芽孢杆菌及其应用 (57)摘要 本发明公开一种高山芽孢杆菌及其应用， 所 述高山芽孢杆菌为高山芽孢杆菌(Bacillus   altitudinis)LH18， 保藏编号为CCTCC  NO： M  20211529， 保藏时间为2021年12月03日。 本发明 菌株能够产淀粉酶、 蛋白酶以及羧甲基纤维素 酶， 且能够对有毒的亚硒酸钠进行还原， 得到粒 径小、 生物活性较好且低毒的纳米硒； 进一步地， 本高山芽孢杆菌LH18在一定浓度含硒的环境中， 不仅将亚硒酸盐类化合物转化为安全性较高的 纳米硒， 还能提高菌株本身产淀粉酶的酶活， 增 强了该菌的生物活性， 扩大了菌株的应用范围， 将其用于制备环境修复制剂、 肥料添加剂等时， 不仅能够转化硒， 起到治理高硒污染环境的作 用， 同时还能降解土壤中大分子物质， 起到改善 土壤条件的功效。 权利要求书1页 说明书8页 附图5页 CN 115232760 A 2022.10.25 CN 115232760 A 1.一种高山芽孢杆菌， 其特征在于， 所述高山芽孢杆菌为高山芽孢杆菌(Bacillus   altitudi nis)LH18， 保藏编号 为CCTCC NO： M 20211529， 保藏时间为2021年12月0 3日。 2.一种如权利要求1所述的高山芽孢杆菌在制备淀粉酶上的应用。 3.如权利要求2所述的高山芽孢杆菌在制备淀粉酶上的应用， 其特征在于， 淀粉酶的制 备包括以下步骤： 获得高山芽孢杆菌的种子液； 将所述种子液接种到 淀粉液体培 养基中， 进行发酵， 得到 淀粉酶； 其中， 所述淀粉液体培养基包括可溶性淀粉20g/L、 酵母3g/L、 蛋白胨3g/L、 MgSO4·7H2O  0.2g/L、 K2HPO4 1g/L、 NaCl  1g/L， pH＝7。 4.如权利要求3所述的高山芽孢杆菌在制备淀粉酶上的应用， 其特征在于， 将所述种子 液接种到 淀粉液体培 养基中， 进行发酵， 得到 淀粉酶的步骤 包括： 将所述种子液接种到淀粉液体培养基中， 向所述淀粉液体培养基中添加亚硒酸钠， 发 酵24～72h， 得到 淀粉酶； 其中， 所述淀粉液体培 养基中， 所述 亚硒酸钠的浓度为2.5～10m mol/L。 5.如权利要求4所述的高山芽孢杆菌在制备淀粉酶上的应用， 其特征在于， 所述亚硒酸 钠的浓度为5m mol/L， 所述发酵的时间为 48h。 6.一种如权利要求1所述的高山芽孢杆菌在制备蛋白酶上的应用。 7.一种如权利要求1所述的高山芽孢杆菌在制备羧甲基纤维素酶上的应用。 8.一种如权利要求1所述的高山芽孢杆菌在制备 肥料添加剂或肥 料上的应用。 9.一种纳米硒， 其特征在于， 所述纳米硒由如权利要求1所述的高山芽孢杆菌还原无机 硒得到。 10.一种如权利要求1所述的高山芽孢杆菌在制备环境 修复制剂上的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115232760 A 2一种高山芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物发酵技 术领域， 特别涉及一种高山芽孢杆菌及其应用。 背景技术 [0002]硒对生物体来说是一种必不可少的微量元素。 近年来， 一些研究发现纳米形态的 单质硒(SeNPs)体内活性 强、 安全性高、 吸收好。 纳米硒具有抗氧化、 免疫调节、 护肝、 促进生 长和高效补硒等药理作用。 如从生物功效来看， 纳米硒表现出较高的自由基清除能力和抗 癌活性。 [0003]目前， 纳米硒的合成方法主要有3种， 分别为物理法、 化学法、 以及生物法。 如何最 大程度降低生产过程中对生态环境的影响和破坏， 也是当前各行业研究的热点之一。 利用 微生物合成方法， 不仅可以制备安全性高、 化学性质稳定的SeNPs， 并且纳米硒 可吸附环境 中重金属 离子形成金属氧化物 ‑纳米硒复合物， 以达到去除重金属污染目的。 如Jiang等报 道Shewanella putrefaciens  200合成的SeNPs能够结合环境中的HgO形成HgSe ‑NPs复合 物， 达到清除汞(Hg)的生物毒害作用； Losi等筛选到的Enterococcus  cloacae SLD1a ‑1已 被运用于农业废水中硒氧 阴离子亚硒酸盐和硒酸盐的生物降解。 发明内容 [0004]本发明的主要目的是提出一种高山芽孢杆菌及其应用， 旨在提供一种高山芽孢杆 菌， 该菌种不仅能够合成纳米硒， 而且能够产淀粉酶、 蛋白酶以及羧甲基纤维素酶。 [0005]为实现上述目的， 本发明利用采自湖 北省恩施富硒地区中的土壤， 从其中分离纯 化得到一株高山芽孢杆菌。 本发明分离纯化得到的高山芽孢 杆菌已经在中 国典型培养物保 藏中心保藏， 地址： 中国武汉武汉大学， 分类命名为高山芽孢杆菌(Bacillus  altitudinis) LH18， 保藏编号 为CCTCC NO： M 20211529， 保藏时间为2021年12月0 3日。 [0006]本发明进一 步提出一种如上文所述的高山芽孢杆菌在制备淀粉酶上的应用。 [0007]可选地， 淀粉酶的制备包括以下步骤： [0008]获得高山芽孢杆菌的种子液； [0009]将所述种子液接种到 淀粉液体培 养基中， 进行发酵， 得到 淀粉酶； [0010]其中， 所述淀粉液体培养基包括可溶性淀粉20g/L、 酵母3g/L、 蛋白胨  3g/L、 MgSO4·7H2O 0.2g/L、 K2HPO4 1g/L、 NaCl  1g/L， pH＝7。 [0011]可选地， 将所述种子液接种到淀粉液体培养基中， 进行发酵， 得到淀粉酶的步骤包 括： [0012]将所述种子液接种到淀粉液体培养基中， 向所述淀粉液体培养基中添加亚硒酸 钠， 发酵24～72h， 得到 淀粉酶； [0013]其中， 所述淀粉液体培 养基中， 所述 亚硒酸钠的浓度为2.5～10m mol/L。 [0014]可选地， 所述 亚硒酸钠的浓度为5m mol/L， 所述发酵的时间为 48h。 [0015]此外， 本发明还提出一种如上文所述的高山芽孢杆菌在制备蛋白酶上的应用。说　明　书 1/8 页 3 CN 115232760 A 3