(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210568958.5 (22)申请日 2022.05.24 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 24333 2022.01.17 (71)申请人 昆明学院 地址 650000 云南省昆明市经济技 术开发 区浦新路2号 (72)发明人 曹艳茹　焦钰　朱国兴　吴雅杰　 苏源　刘子超　 (74)专利代理 机构 北京市盈科律师事务所 11344 专利代理师 荔恒辉 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/20(2020.01)A01P 21/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一株马西利亚菌菌株KC 009， 其发酵液及应 用 (57)摘要 本发明提供一株马西利亚菌(Massilia   consociata)菌株 KC 009， 其特征在于， 所述菌株 保藏编号为CGMCC  No.24333； 本发明还 提供含有 所述的马西利亚菌菌株KC  009的发酵液及其应 用。 本发明KC  009发酵液可促进菊花插穗生根， 增加根长、 增加根量、 不污染环境； 同时， 可将菌 株KC 009应用于菊花育苗， 解决扦插菊花生根能 力差的问题， 实现工厂化育苗， 利于产业 化生产。 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图6页 CN 114958664 A 2022.08.30 CN 114958664 A 1.一株马西利亚菌(Massilia  consociata)菌株KC  009， 其特征在于， 所述菌株保藏编 号为CGMCC No.24333。 2.如权利要求1所述的一株马西利亚菌菌株KC  009， 其特征在于， 所述菌株16S  rRNA基 因序列如SEQ  ID No.1所示。 3.一种含有权利要求1或2所述的马西利亚菌 菌株KC 009的发酵 液。 4.如权利 要求3所述的马西利亚菌菌株KC  009的发酵液， 其特征在于， 所述发酵液通过 以下步骤获得： 步骤一， 制备改良ISP  2培养基： 称取动物蛋白胨1～10g， 大豆蛋白胨0.5～5g， 酵母膏2 ～20g， 葡萄糖2～20 g， 麦芽浸粉2.5～25 g， 微量盐0.5～5ml和复合维生素0.005～0.05mg， 用自来水 溶解并定容至 0.5～5L， 调节pH 到7.0～7.5， 121℃灭菌20～3 0分钟。 步骤二， 发酵： 在装有50～150mL改良ISP  2液体培养基的三角瓶中接种菌株KC  009， 25 ～30℃恒温摇床10 0～200rpm培养3～8天， 得到发酵 液。 5.如权利 要求4所述的马西利亚菌菌株KC  009的发酵液， 其特征在于， 所述微量盐组成 为： FeSO4·7H2O 0.05g， MnCl2·4H2O 0.05g， ZnSO4·7H2O 0.5g， 水5 0ml。 6.如权利 要求4所述的马西利亚菌菌株KC  009的发酵液， 其特征在于， 所述复合维生素 组成为： 维生素B6占复合维生素用量的2/ 3， 生物素占复合维生素用量的1/ 3。 7.如权利要求1或2所述的马西利亚菌 菌株KC 009在育苗中的应用。 8.如权利要求3～6任一项所述的马西利亚菌菌株KC  009发酵液在菊花生根繁殖中的 应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958664 A 2一株马西利亚菌 菌株KC 009， 其发酵液及应用 技术领域 [0001]本发明涉及一株马西利亚菌菌株KC  009， 其发酵液及应用， 属微生物菌肥技术领 域。 背景技术 [0002]菊花(Chrysanthemum  morifolium)是我国十大传统名花， 也是世界四大切花之 一。 我国作为菊花栽培的起源中心和菊属种质资源的分布中心， 有着悠久的栽培历史。 菊属 植物有40余种， 在我国分布的有  20余种， 栽培菊 园艺品种达数千余个。 菊花除了具极高的 观赏价值外， 还 可入药， 具有散风清热、 平肝明目、 清热解毒之功效， 亦可用作茶饮、 食用； 现 代更是将其进行深度 处理用于化妆品等工业的开发。 菊花由于用途广泛， 因而市场需求较 大， 这也促进了菊花的快速繁殖研究。 目前， 菊花常用的繁殖方法有： 种子(播种)繁殖、 分株 繁殖、 组培繁殖和扞插繁殖。 由于播种苗很难保持原有品种的特性， 分株繁殖的繁殖系数较 低， 组培繁殖需要建立无菌体系、 炼苗历时较长， 因此菊花种苗生产中常采用扞插繁殖。 扞 插能够保持品种的优良性状、 繁殖系数较高、 成苗时间短， 是菊花大规模工厂化生产的最优 繁殖途径。 但菊花扦插育苗时， 插穗的生根数量少、 生根质量差严重制约了其市场供给和产 业化应用。 [0003]土壤微生物可以分泌激素来调节植物生长， 也可以通过固氮、 解磷、 解钾来促进植 物生长、 增加植物的抗性、 改善土壤微生态， 因此在植物促生根领域有着较好的应用潜力。 马西利亚菌(Massilia)广泛分布于植物 根际， 具有固氮、 解磷、 产激素、 产铁载体和ACC脱氨 酶等促进植物生长的功能， 其中固氮和解无机磷的能力较强。 马西利亚菌能提高番茄、 黄 瓜、 甘草和黄芪的发芽率、 株高、 根长、 干重和鲜重， 但目前还未见其在促进菊花生根繁殖方 面的研究报道。 发明内容 [0004]为了解决菊花扦插育苗时生根数量少、 生根质量差 的问题， 本发明提供一种马西 利亚菌(Mas silia consociata)菌株KC  009， 保藏编号 为CGMCC No.24333； [0005]本发明马西利亚菌菌株KC  009筛选自云南昆明轿子山土壤， 具有提高菊花扦插生 根数量和质量的作用； [0006]本发明利用细菌的16S  rRNA基因通用引物对筛选到的菌株KC  009进行PCR扩增及 测序鉴定： 按细菌DNA提取试剂盒操作说明书提取模板DNA， 扩增细菌16S  rRNA基因片段， 经 过测序鉴定该菌为马西利亚菌(Massilia  consociata)， 其16S  rRNA基因序列如  SEQ ID  No.1所示； [0007]本发明将筛选到的马西利亚菌菌株KC  009 马赛菌(Massilia  sp)于2022 年1月17 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏单位简称： CGMCC， 保藏单 位地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所， 保藏编号为CGMCC   No.24333；说　明　书 1/7 页 3 CN 114958664 A 3