(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210728671.4 (22)申请日 2022.06.24 (66)本国优先权数据 202210113422.4 2022.01.30 CN (71)申请人 中国人民解 放军空军 军医大学 地址 710032 陕西省西安市新城区长乐西 路169号空军 军医大学 (72)发明人 田韵远　汤海峰　陆云阳　刘杨　 胡晋铭　陈文文　袁晓峰　曹宇　 (74)专利代理 机构 西安吉盛专利代理有限责任 公司 61108 专利代理师 张恒阳 (51)Int.Cl. C07J 71/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61K 31/7048(2006.01) (54)发明名称 一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合 物和制备及用途 (57)摘要 本发明涉及医药技术领域， 具体是一种从具 柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物和制备及用 途， 甾体皂苷类化合物分子式为C44H70O17， 化学结 构式为： 本发明的甾体皂苷类化合物对U87MG(人胶质瘤 细胞)、 U251(人胶质瘤细胞)、 HepG2(人肝癌细 胞)和SGC ‑7901(人胃癌细胞)这几种人肿瘤细胞 系均有显著的抑制作用， 其半数抑制浓度(IC50 值)分别为8.29 ±0.08， 6.07 ±0.06， 8.24 ±0.57 和6.20±0.79μM。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 114920796 A 2022.08.19 CN 114920796 A 1.一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物， 其特征在于： 该甾体皂苷类化合物分 子式为C44H70O17， 其化学结构式为： 上述结构的化学名称为偏诺皂苷元 ‑3‑O‑β‑D‑呋喃芹糖基 ‑(1→4)‑[α‑L‑吡喃鼠李糖 基‑(1→2)]‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷， 是从具柄重楼中分离得到的甾体皂苷类化合物， 简称为 PFP1。 2.根据权利要求1所述的一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的制备方法， 其 特征在于： 以具柄重楼为原料， 将其根茎粉碎成粗粉后， 取2kg， 加入20L质量百分比浓度为 70％的乙醇进行回流提取， 共提取5次， 每次2小 时， 合并提取液， 减压回收乙醇， 得提取物； 将提取物分散于8L水中， 用石油醚萃 取3次， 每次8L； 萃 取后的水相再用水饱和正丁醇萃 取3 次， 每次8L， 合并水饱和正 丁醇萃取 液， 减压回收正 丁醇后得到总皂苷提取物； 将总皂苷提取物进行硅胶柱层 析， 以体积比为100:1:0～65:35:5的二 氯甲烷‑甲醇‑水 混合溶剂的下层饱和溶剂作为洗脱 液进行梯度洗脱， 以200 mL为一个流份进 行接收， 并用硅 胶薄层层析检测， 收集Rf值在0.4～0.65处显示紫红色斑点的流份， 即为含化合物PFP1的总 皂苷混合物， 减压蒸干溶剂后得3.8g样品； 样品采用葡聚糖凝胶柱层析， 以甲醇洗脱， 按200mL为一个流份接收， 薄层层析检测， 合 并含PFP1的第13～17流份， 减压蒸干溶剂后得1.4g样品； 将1.4g样品再用反相柱层析， 以甲醇:水按体积比2:3～1:0洗脱， 按100mL为一个流份 接收， 薄层 层析检测， 合并含PFP1的第20～34 流份， 减压蒸干溶剂后得812.8mg样品； 最后经半制备高效液相色谱HPLC分离纯化得到PFP1的纯品。 3.根据权利要求1所述的一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的用途， 其特征 在于： 所述甾体皂苷类化 合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 4.根据权利要求3所述的一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的用途， 其特征 在于： 所述甾体皂苷类化 合物在制备抗胶质瘤、 肝癌或胃癌药物中的应用。 5.根据权利要求3所述的一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的用途， 其特征 在于： 所述的胶质瘤为U87MG人胶质瘤细胞或U251人胶质瘤细胞， 所述的肝癌为HepG2人肝 癌细胞， 所述的胃癌为SGC ‑7901人胃癌细胞。 6.根据权利要求3 ‑5任意一项所述的一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的用 途， 其特征在于： 所述甾体皂苷类化合物单独使用或与其他药物混合， 配制成在临床上使用 的注射剂、 或散剂、 或丸剂、 或片剂、 或微囊剂、 或软胶 囊剂、 或膜剂、 或膏剂、 或酊剂、 或颗粒 剂、 或气雾剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114920796 A 2一种从具柄重 楼中提取的甾体皂苷类化合物和制备及用途 技术领域 [0001]本发明涉及一种从重楼属(Paris)植物具柄重楼(Paris  fargesii   var.petiolate)中提取分离得到的新的化合物， 具体涉及一种从具柄重楼中提取的甾体皂 苷类化合物和制备及用途， 属于医药技 术领域。 背景技术 [0002]肿瘤是人类死亡的主要原因之一， 抗肿瘤药物的研发成为医药领域研究的重点和 难点。 抗肿瘤化药 因毒副作用大、 易产生耐药性以及不良的预后， 使得越来越多的研究者将 目光转向天然药物。 其中， 皂苷的抗肿瘤作用备受关注， 它们广泛存在于植物体内， 种类繁 多， 组成复杂。 目前研究较多的甾体皂苷类成分以重楼皂苷为主， 如重楼皂苷 Ⅰ、 重楼皂苷 Ⅱ、 重楼皂苷 Ⅴ、 重楼皂苷 Ⅵ、 重楼皂苷 Ⅶ等， 以及人参皂苷、 柴胡皂苷、 甘草皂苷等三萜皂 苷。 [0003]中药重楼为百合科(Liliaceae)重楼属云南重楼(Paris  polyphylla  Smith  var.yunnanensis)或七叶一枝 花(P.polyphylla  var.chinen sis)的干燥根茎， 具有清热解 毒、 消肿止痛和凉肝定惊的功效， 常用于疔疮痈肿、 咽喉肿痛、 虫蛇咬伤、 跌打损伤、 惊风抽 搐等证， 是著名中成药云南白药胶囊、 痛血康胶囊、 热毒清片等的主要组成药材。 药理研究 发现， 重楼的主要 药效物质即为甾体皂苷， 亦总称为重楼皂苷， 现代临床上常用于炎症的治 疗。 [0004]具柄重楼(P.fargesii  var.petiolate)属于南重楼组植物球药隔重楼的变种， 多 生于海拔1150～2270 m阴湿的阔叶林下， 主要分布于我国西南各省区， 如江西、 广西、 贵州和 四川。 具柄重楼的根茎粗壮， 具有较高的药用价值， 但是， 尚未见对其化学成分分离鉴定研 究以及抗肿瘤活性方面研究的相关报道。 发明内容 [0005]本发明的目的之一是： 提供一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化 合物。 [0006]本发明的目的之二是： 提供一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的制备方 法。 [0007]本发明的目的之三是： 提供一种 从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物的用途。 本发明的甾体皂苷类化合物能够对胶质瘤细胞、 肝癌细胞和胃癌细胞均有显著的抑制作 用。 [0008]本发明的技术方案是： 一种从具柄重楼中提取的甾体皂苷类化合物， 该甾体皂苷 类化合物分子式为C44H70O17， 其化学结构式为：说　明　书 1/6 页 3 CN 114920796 A 3