(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210741605.0 (22)申请日 2022.06.27 (71)申请人 温州医科 大学附属第二医院 （温州 医科大学附属育 英儿童医院） 地址 325000 浙江省温州市学院西路109号 (72)发明人 谢聪颖　王赛君　沈建良　 (74)专利代理 机构 北京祺和祺知识产权代理有 限公司 1 1501 专利代理师 陈瑶瑶 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 31/44(2006.01) A61K 9/14(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/64(2017.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种MHI-148化学修饰的白蛋白结合型索拉 非尼纳米制剂制备方法及应用 (57)摘要 本发明涉及一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白 结合型索拉非尼纳米制剂制备方法及应用， 包括 如下步骤： S1、 合成MHI ‑148化学修饰的白蛋白 (BSA‑MHI148)； S2、 BSA ‑MHI148@SRF纳米粒子的 合成； 所述白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂 (BSA‑MHI148@SRF)用于抗肿瘤治疗的作用。 本发 明的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂(BSA ‑ MHI148@SRF)能够同时解决肿瘤乏氧和高表达 PD‑L1的问题。 权利要求书1页 说明书4页 附图6页 CN 115105594 A 2022.09.27 CN 115105594 A 1.一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制备方法， 其特征在于： 包 括如下步骤： S1、 合成M HI‑148化学修饰的白蛋白(BSA ‑MHI148)： 将MHI‑148溶解在DMSO中 以形成浓度为10mg/mL的溶液A， 然后将溶液A与4 ‑(4,6‑二甲 氧基三嗪 ‑2‑基)‑4‑甲基吗啉盐酸盐(DMTMM)在避光条件下混合1h以对MHI ‑148进行活化， 随后将上述活化的M HI‑148与白蛋白混合， 溶解在 双蒸水中以得到混合物 A； 将得到的混合物A在室温下搅拌6h， 然后用纯H2O透析(相对分子质量＝10kDa)5次， 除去 游离的MHI‑148、 DMTM M和DMSO， 得到纯的BSA ‑MHI148； S2、 BSA‑MHI148@SRF纳米粒子的合成： 将索拉非尼溶解在DMF中以形成浓度为12mg/mL的溶液B， 然后将溶液B滴加到BSA ‑ MHI148溶液中， 搅拌30秒后， 用超滤杯(MW＝30kDa)去除游离的索拉非尼， 即得到MHI148化 学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂(BSA ‑MHI148@SRF)。 2.根据权利要求1所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特 征在于： 所述索拉非尼包括索拉非尼衍 生物中的一种或多种。 3.根据权利要求2所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特 征在于： 所述白蛋白为人 血清白蛋白、 牛 血清白蛋白中的至少一种。 4.根据权利要求3所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特 征在于： 所述BSA ‑MHI148为M HI‑148分子与牛 血清白蛋白通过DMTM M缩合而成。 5.根据权利要求4所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特 征在于： 所述 步骤S2中的BSA ‑MHI148溶液的浓度为2mg/mL。 6.根据权利要求5所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特征在于： 所述步骤S2中的索拉非尼通过悬滴的方式加入BSA ‑MHI148溶液中， 两 者自组装形成纳米制剂。 7.根据权利要求5所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特 征在于： 所述 步骤S1中的M HI‑148与白蛋白的质量比为1： 5 0。 8.根据权利要求5所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制 备方法， 其特征在于： 所述步骤S1 中制备出的纯的BSA ‑MHI148， 最后用真空冷冻干燥法制备 BSA‑MHI148粉末。 9.根据权利要求1 ‑8任一所述的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米 制剂制备方法的应用， 其特征在于： 所述白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂(BSA ‑MHI148@ SRF)用于抗肿瘤治疗的作用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115105594 A 2一种MHI‑148化学修饰的白蛋白结 合型索拉非尼纳米制剂制 备方法及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 尤其是涉及一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合 型索拉非尼纳米制剂制备 方法及应用。 背景技术 [0002]光动力疗法(PDT)是一种治疗疾病的新型疗法， 具有无创、 时空可控性高、 安全性 好等优点， 被认为是一种十 分有前途的癌症治疗手段。 在分子氧存在的情况下， 光动力治疗 通过产生活性氧(ROS)来杀死癌细胞， 但是肿 瘤乏氧的状态会影响ROS的产生， 导致光动力 治疗对肿瘤的疗效有限。 尽管 “Warburg效应 ”是肿瘤能量的主要来源， 但肿瘤细胞线 粒体相 关氧化磷酸化(OXPHOS)的过度表达仍然存在于许多肿瘤细胞系中， 导致大量的生理性耗 氧， 再加上 未成熟和异常的肿瘤血 管诱导的氧气供应不足， 加剧了肿瘤乏氧。 [0003]此外， 在某些情况下， 光动力治疗后由于干扰素γ的产生， 肿瘤中PD ‑L1的表达显 著增加， 减弱T淋巴细胞的杀伤效应， 从而诱导免疫耐受。 因此， 我们迫切需要开 发一种药物 能够同时解决肿瘤乏氧和高表达P D‑L1的问题， 有 待改进。 发明内容 [0004]有鉴于现有技术的上述问题， 本发明的目的是克服现有技术中的不足， 提出一种 MHI‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制备 方法及应用。 [0005]本申请提供的一种MHI ‑148化学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂制备方 法， 包括如下步骤： [0006]S1、 合成M HI‑148化学修饰的白蛋白(BSA ‑MHI148)： [0007]将MHI‑148溶解在DMSO中以形成浓度为10mg/mL的溶液A， 然后将溶液A与4 ‑(4,6‑ 二甲氧基三嗪 ‑2‑基)‑4‑甲基吗啉盐酸盐(DMTMM)在 避光条件下混合1h以对MHI ‑148进行活 化， 随后将上述活化的M HI‑148与白蛋白混合， 溶解在 双蒸水中以得到混合物 A； [0008]将得到的混合物A在室温下搅拌6h， 然后用纯H2O透析(相对分子质量＝10kDa)5 次， 除去游离的M HI‑148、 DMTM M和DMSO， 得到纯的BSA ‑MHI148； [0009]S2、 BSA‑MHI148@SRF纳米粒子的合成： [0010]将索拉非尼溶解在DMF中以形成浓度为12m g/mL的溶液B， 然后将溶液B滴加到BSA ‑ MHI148溶液中， 搅拌30秒后， 用超滤杯(MW＝30kDa)去除游离的索拉非尼， 即得到MHI148化 学修饰的白蛋白结合型索拉非尼纳米制剂(BSA ‑MHI148@SRF)。 [0011]进一步的， 所述索拉非尼包括索拉非尼衍 生物中的一种或多种。 [0012]进一步的， 所述白蛋白为人 血清白蛋白、 牛 血清白蛋白中的至少一种。 [0013]进一步的， 所述BSA ‑MHI148为M HI‑148分子与牛 血清白蛋白通过DMTM M缩合而成。 [0014]进一步的， 所述 步骤S2中的BSA ‑MHI148溶液的浓度为2mg/mL， 溶剂为水。 [0015]进一步的， 所述步骤S2中的索拉非尼通过悬滴的方式加入BSA ‑MHI148溶液中， 两说　明　书 1/4 页 3 CN 115105594 A 3