(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210733851.1 (22)申请日 2022.06.27 (71)申请人 新疆前进荣耀投资有限公司 地址 830000 新疆维吾尔自治区乌鲁 木齐 市沙依巴克区友好北路374 号6栋1-1 (72)发明人 李金耀　马荣斌　夏丽洁　何美珠　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 刘晓静 (51)Int.Cl. A61K 36/28(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种中亚苦蒿总黄酮的提取方法 (57)摘要 本发明提供了一种中亚苦蒿总黄酮的提取 方法， 属于植物黄酮提取技术领域。 本发明通过 特定的酶解、 灭酶、 超声、 离心等步骤， 克服了现 有技术中提取方法得率较低、 活性成分损失等问 题。 本发明提供的中亚苦蒿总黄酮提取方法得到 的总黄酮得率可达4.75％， 提取得到的总黄酮中 含有41种有效化合物， 能够 有效抑制肿瘤细胞生 长、 促进肿瘤细胞凋亡。 权利要求书1页 说明书14页 附图8页 CN 115040557 A 2022.09.13 CN 115040557 A 1.一种中亚苦蒿总黄酮的提取 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 将中亚苦蒿粉末与乙醇水 溶液、 复合酶混合， 进行酶解， 得到酶解液； 将酶解液依次进行灭酶、 超声、 离心， 所 得上清液即为中亚苦蒿总黄酮。 2.根据权利要求1所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述中亚苦蒿粉末 的粒径为90 μm以下。 3.根据权利要求2所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述中亚苦蒿粉末 与乙醇水 溶液的质量体积比为1g:20～3 0mL； 所述乙醇水 溶液的体积浓度为80～10 0％。 4.根据权利要求3所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述复合酶的添加 量为中亚苦蒿粉末质量的1.5～ 2.5％。 5.根据权利要求4所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述复合酶的种类 为纤维素酶和果胶酶； 所述纤维素酶和果胶酶的添加比例为1:0.5～0.7。 6.根据权利要求5所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述纤维素酶的酶 活为40～60U/mg， 所述 果胶酶的酶活为 400～600U/mg。 7.根据权利要求6所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述酶解的pH为3 ～4， 所述酶解的温度为 40～50℃， 所述酶解的时间为10 0～110min。 8.根据权利要求7所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述灭酶的温度为 80～120℃， 所述灭酶的时间为3～8mi n。 9.根据权利要求8所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述超声的功率为 50～150W， 所述超声的温度为20～40℃， 所述超声的时间为10～3 0min。 10.根据权利要求9所述的中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 其特征在于， 所述离心的转速 为10000～14000r/min， 所述离心的时间为5～15mi n。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115040557 A 2一种中亚苦 蒿总黄酮的提取方 法 技术领域 [0001]本发明涉及植物黄酮提取技 术领域， 尤其涉及一种中亚苦蒿总黄酮的提取 方法。 背景技术 [0002]中亚苦蒿， 属桔梗目， 菊科， 俗称艾草。 它是一种重要的多年生药用植物， 在我国主 要分布在新疆、 四川、 云南等地。 此外， 中亚苦蒿中含有丰富的次生代谢产物， 包括黄酮类、 生物碱、 酚类、 萜类及衍生物等。 具有多种药理活性(例如抗菌、 抗炎、 抗病毒、 保肝、 降血糖 和心血管疾病等)， 它还显示出广泛的抗氧化和抗癌作用。 [0003]生物总黄酮也称黄酮类化合物， 是一种天然的植物成分。 已从植物中鉴定和分离 出8000多种， 其结构通过两个酚羟基的苯环(A环和B环)， 以三碳键相互连接所形成的一系 列(C6‑C3‑C6)化合物。 依据结构多样性可分为6类黄酮类、 异黄酮类、 萜类、 生物碱类、 花青素 类。 越来越多的研究报道， 黄酮类化合物在肿瘤的治疗与预防方面具有显著作用。 这归因于 它们多样的结构和广泛的活性(如抗炎、 抗氧化、 抗高血脂等)。 目前， 黄酮类化合物提取方 法主要包括加热回流 提取法、 有机溶剂萃取法、 微波辅助提法、 超声辅助法、 酶解法等。 [0004]发明人日前研究发现， 传统提取方法工艺设备虽然比较简单， 但提取的时间长、 效 率不高， 且易在高温下破坏热不稳定成分使其降解， 并且由于中亚苦蒿 中总黄酮的含量较 低且及其复杂， 不能实现较高得率， 提取 出的总黄酮活性较低。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种中亚苦蒿总黄酮的提取方法， 用以解决现有技术中提 取方法得率较低、 活性成分损失等问题。 [0006]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0007]本发明提供了一种中亚苦蒿总黄酮的提取 方法， 包括如下步骤： [0008]将中亚苦蒿粉末与乙醇水 溶液、 复合酶混合， 进行酶解， 得到酶解液； [0009]将酶解液依次进行灭酶、 超声、 离心， 所 得上清液即为中亚苦蒿总黄酮。 [0010]优选的， 所述中亚苦蒿粉末的粒径为90以下 μm。 [0011]优选的， 所述中亚苦蒿粉末与乙醇水 溶液的质量体积比为1g:20～3 0mL； [0012]所述乙醇水 溶液的质量体积浓度为80～10 0％。 [0013]优选的， 所述复合酶的添加量 为中亚苦蒿粉末质量的1.5～ 2.5％。 [0014]优选的， 所述复合酶的种类为纤维素酶和果胶酶； [0015]所述纤维素酶和果胶酶的添加比例为1:0.5～0.7。 [0016]优选的， 所述纤维素酶的酶活为 40～60U/mg， 所述 果胶酶的酶活为 400～600U/mg。 [0017]优选的， 所述酶解的pH为3～4， 所述酶解的温度为40～50℃， 所述酶解的时间为 100～110min。 [0018]优选的， 所述灭酶的温度为80～120℃， 所述灭酶的时间为3～8mi n。 [0019]优选的， 所述超声的功率为50～150W， 所述超声的温度为20～40℃， 所述超声的时说　明　书 1/14 页 3 CN 115040557 A 3