(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210736723.2 (22)申请日 2022.06.27 (71)申请人 重庆理工大 学 地址 401320 重庆市巴南区红光大道69号 (72)发明人 张成元　李柏军　周兴　周雪梅　 林永耀　 (74)专利代理 机构 成都睿道专利代理事务所 (普通合伙) 51217 专利代理师 王小艳 (51)Int.Cl. A61K 47/64(2017.01) A61K 31/7068(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C07K 5/103(2006.01)C07K 1/06(2006.01) C07K 1/02(2006.01) (54)发明名称 一种肽类树形分子载药体系及其制备方法 和应用 (57)摘要 本发明涉及医药技术领域， 基于解决可同时 实现不同化疗机制药物协同治疗以及不同治疗 机制药物协同治疗的全方位环境响应型协同纳 米载药系统构建的问题， 提供了一种肽类树形分 子载药体系， 包括酶响应肽类树形分子 ‑吉西他 滨偶联物和阿霉素， 所述酶响应肽类树形分子 ‑ 吉西他滨偶联物和阿霉素的质量比为10:1 ‑1: 10， 可同时实现不同化疗机制药物协同治疗以及 不同治疗机制药物协同治疗的全方位环境响应 型协同纳米系统， 通过协同作用药物在病灶区域 的精准同步释放； 且多种协同治疗 策略的共同作 用获得良好的化疗与免疫激活治 疗效果。 权利要求书2页 说明书11页 附图4页 CN 115068624 A 2022.09.20 CN 115068624 A 1.一种肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 包括酶响应肽类树形分子 ‑吉西他滨偶联 物和阿霉素， 所述酶响应肽类树形分子 ‑吉西他滨偶联物和阿霉素的质量比为10:1 ‑1:10。 2.根据权利要求1所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 所述酶响应肽类树形分 子‑吉西他滨偶联物和阿霉素的质量比为2:1 ‑1:2。 3.根据权利要求1所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 所述酶响应肽类树形分 子‑吉西他滨偶联物的结构如下 所示： 。 4.根据权利要求3所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 所述酶响应肽类树形分 子‑吉西他滨偶联物的合成步骤如下 所示： (1)Boc‑(Lys‑Glu)‑Ome的合成， 包括如下步骤： 在氮气保护下， Boc ‑Lys用DCM溶解冰浴下加入TFA， 待温度升至室温后继续反应， 反应 结束后抽干TFA， 加入无水乙醚洗涤、 干燥。 在氮气保护下， 将脱Boc的Lys与Boc ‑Glu(OMe) ‑ OH、 EDC、 HOBT溶解在DMF中， 冰浴下加入DIPEA反应， 反应结束后， 加入乙酸乙酯， 依次使用饱 和NaHCO3溶液、 0.5M盐酸溶液、 饱和NaCl溶液萃取， 萃取完成后用无水硫酸镁对反应产物进 行干燥、 过 滤， 减压浓 缩， 在正己烷中重结晶， 过 滤、 干燥得固体产物Boc ‑(Lys‑Glu)‑Ome。 (2)N3‑GFLG‑GEM的合成， 包括如下步骤： 在避光、 氮气保护条件下， 将N3 ‑GFLG‑OH、 盐酸吉西他滨、 HBTU、 HOBT依次溶解于DMF中， 在冰浴条件下加入DIPEA， 待温度升至室温后继续反应， 反应结束后加入乙酸乙酯， 依次使 用饱和NaHCO3溶液、 0.5M盐酸溶液、 饱和NaCl溶液萃取， 萃取完成后用无水硫酸镁对反应产 物进行干燥、 过滤， 得到的反应产物蒸发出有机溶剂， 随后用正己烷进行重结 晶， 过滤得到 固体产物， 真空干燥箱中室温干燥， 得N3 ‑GFLG‑GEM。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115068624 A 2(3)酶响应肽类树形分子 ‑吉西他滨偶联物的合成， 包括如下步骤： (3.1)Boc ‑G3‑Alkyne的合成： 用甲醇将步骤(1)得到的Boc ‑(Lys‑Glu)‑OMe溶解， 在冰 浴条件下缓慢滴加NaOH溶液， 蒸出甲醇， 加入0.5M 盐酸溶液调节pH至2 ‑3， 然后透析， 收集透 析袋中的固体， 冷冻干燥， 得Boc ‑(Lys‑Glu)‑OH。 在氮气保护下， 将Boc ‑(Lys‑Glu)‑OH、 EDC、 HOBT依次溶解于DMF中； 同时在冰浴条件下加入炔丙胺和DIPEA室温反应； 反应结束后加入 0.5M盐酸溶液调节pH至中性， 然后将其透析， 收集透析袋中的固体， 冷冻干燥， 得Boc ‑(Lys‑ Glu)‑Alkyne； (3.2)Boc ‑(Lys‑Glu)‑PEG的合成： 用Boc ‑(Lys‑Glu)‑Alkyne合成Boc ‑(Lys‑Glu)‑PEG； (3.3)PEG ‑(Lys‑Glu)‑Alkyne的合成： 用Boc ‑(Lys‑Glu)‑PEG合成PEG ‑(Lys‑Glu)‑ Alkyne； (3.4)PEG ‑(Lys‑Glu)‑GFLG‑GEM的合成： 用超纯水将L ‑抗坏血酸钠溶解， 在氮气保护下， 将PEG ‑(Lys‑Glu)‑Alkyne、 步骤(2)制 备得到的N3 ‑GFLG‑GEM、 CuSO4·5H2O依次溶解于二甲亚砜中； 在冰浴条件下将L ‑抗坏血酸钠 注入上述反应中， 在油浴锅中反应， 然后 将其透析， 收集透析袋中的固体， 冷冻干燥， 即得酶 响应肽类树形分子 ‑吉西他滨偶联物。 5.根据权利 要求4所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 步骤(3.2)中， 用超纯水 将L‑抗坏血酸钠溶解， 在氮气保护下， 将Boc ‑(Lys‑Glu)‑Alkyne、 N3 ‑PEG、 CuSO4·5H2O依次 溶解于二甲亚砜中； 在 冰浴条件下将L ‑抗坏血酸钠注入上述反应中， 在油浴锅中反应， 然后 将其透析， 收集透析袋中的固体， 冷冻干燥， 即得Boc ‑(Lys‑Glu)‑PEG。 6.根据权利 要求4所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 步骤(3.3)中， 在氮气保 护下， 将Boc ‑(Lys‑Glu)‑PEG用DCM完全溶解， 在冰浴条件下加入TFA， 待温度升至室温后继 续反应， 反应结束后抽干TFA， 加入无水乙醚洗涤、 干燥； 在氮气保护下， 将脱Boc的(Lys ‑ Glu)‑PEG、 HBTU、 HOBT、 己炔酸依次溶解于DMF中， 在室温下反应， 反应结束后， 在冰浴条件下 用0.5M盐酸溶液调节pH至中性， 然后将其透析， 收集透析袋中的固体， 冷冻干燥， 即得PEG ‑ (Lys‑Glu)‑Alkyne。 7.根据权利要求4所述的肽类树形分子载药体系， 其特征在于， 步骤(2)中， 用甲醇将 N3‑GFLG‑OMe完全溶解， 冰浴下加入NaOH反应， 蒸出甲醇， 加入0.5M盐酸溶液调节pH至2 ‑3， 加入乙酸乙酯萃 取， 加入饱和NaCl溶液洗涤 三次， 萃取完成后用NaCl溶液对其进行洗涤， 重 复三次， 洗涤得到的有机溶液用无水硫酸镁对其进行干燥， 得到的反应产物用旋转蒸发仪 旋出有机溶剂， 随后用正己烷进行重结晶， 过 滤， 真空干燥后得到N3 ‑GFLG‑OH。 8.一种根据权利要求1 ‑7任一项所述的肽类树形分子载药体系的制备方法， 其特征在 于， 包括以下步骤： 将酶响应肽类树形分子 ‑吉西他滨偶联物溶解后， 得到pGE水溶液； 将阿 霉素溶于有机溶剂中， 完全溶解后， 缓慢滴加至pGE水 溶液中， 即得肽类树形分子载 药体系。 9.根据权利要求8所述的肽类树形分子载药体系的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶 剂包括二甲基亚砜、 N,N ‑二甲基甲酰胺中的一种或几种。 10.一种根据权利要求1 ‑7任一项所述的肽类树形分子载药体系的应用， 其特征在于， 用于制备递送一种或多种治疗剂的药物制剂。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115068624 A 3