(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210734741.7 (22)申请日 2022.06.27 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 (72)发明人 隋梅花　陈宇　陆欢　李晨　吴昊　 (74)专利代理 机构 杭州君锐知产专利代理事务 所(普通合伙) 33443 专利代理师 黄欢娣 (51)Int.Cl. A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 1/02(2006.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 抗口腔肿瘤药物活性成分及其用途 (57)摘要 本发明公开了用于治疗/预防口腔肿瘤药物 的活性成分及其用途。 所述的活性成分从 SEQIDNO.1～SEQIDNO.6出发， 可以为SEQIDNO.1 ～SEQIDNO.6的衍生物等， 上述活性成分可参与 调节基因的表达， 具有治疗/预防口腔肿瘤的作 用； 这些活性miRNA可能调节免疫细胞的早期发 育， 影响免疫细胞发育及分化； 活性 miRNA可能参 与免疫功能的调控， 对口腔肿瘤具有治疗/预防 作用。 本发明提出的活性miRNA在脂质体中的转 染效率高， 转染后的抗肿瘤效果显著。 权利要求书1页 说明书11页 序列表2页 附图6页 CN 115381849 A 2022.11.25 CN 115381849 A 1.一种用于治疗/预防口腔肿瘤药物的活性成分， 其特征在于， 所述的活性成分至少选 自以下之一： (a)序列如SEQ  ID NO.1～SEQ  ID NO.6任一项所示的miRNA ‑X， 或所述miRNA ‑X的任意 组合， 或经修饰的miRNA ‑X的衍生物； (b)前体miRNA， 所述的前体miRNA能在 宿主内加工成(a)中所述的miRNA ‑X； (c)多核苷酸， 所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA， 并加工形成 (a)中所述的miRNA； (d)表达载体， 所述表达载体含有(a)中所述的miRNA ‑X的miRNA、 或(b)中所述的前体 miRNA、 或(c)中所述的多 核苷酸； (e)所述(a)中所述的miRNA的激动剂。 2.根据权利要求1所述的活性成分， 其特征在于， 所述miRNA ‑X的组合为： SEQ  ID NO.1 和SEQ ID NO.3所示的miRNA ‑X的组合。 3.如权利要求1或2所述的活性成分， 其特征在于， 激动剂选自下组： 促进miRNA ‑X表达 的物质、 提高miRNA ‑X活性的物质。 4.如权利要求1或2所述的活性成分的用途， 所述的活性成分用于制备一药物， 所述药 物用于治疗/预防口腔肿瘤。 5.根据权利要求4所述的用途， 其特征在于， 所述的药物含有权利要求1或2所述的活性 成分， 和药 学上可接受的溶媒或者载体。 6.根据权利要求4所述的用途， 其特征在于， 所述的药物的制 剂形式为冻干粉针、 微针、 注射剂、 片 剂、 贴剂、 胶囊、 口服混悬 液或介入栓塞用微球等。 7.根据权利要求4所述的用途， 其特征在于， 所述药物的递送方法有： 转载法、 装载药物 法、 直接裸RNA注射法、 脂质体包裹RNA直接注射法和纳米材料组装法等阳离子材料复合物 递送法， 以及 细菌携带质粒表达RNA法、 病毒包 装表达RNA法等 递送方式。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115381849 A 2抗口腔肿瘤药物活性成分及其用途 技术领域 [0001]本发明属于医药技术领域， 涉及相关的活性成分在制 备治疗/预防口腔肿瘤药物 上的用途。 背景技术 [0002]口腔肿瘤(Oral  Cancer)是一种较为常见、 严重危及健康和生存质量的恶性肿瘤， 高发于亚洲地区。 根据 GLOBOCAN在2020年做的统计， 口腔肿瘤的全球新增病例为37713例， 其中亚洲人口占65.8％， 2020年全球口腔肿瘤患者死亡率为177757例， 其中亚洲占74％。 口 腔肿瘤的治疗主要包括外科手术切除、 放射治疗、 化学治疗或几种抗癌疗法的结合。 近年 来， 尽管口腔肿瘤在影像学诊断、 手术技术、 放化疗以及全身疗法等方面取得了长足的进 步， 但口腔肿瘤患者的5年内生存率仍不理想。 特别需要关注的是， 在过去的三十年间口腔 肿瘤的生存率一直未能得到改善。 其中主要的原因之一是用于治疗口腔肿瘤的一线化疗药 物在使用后会诱导使肿瘤出现耐药性， 而耐药 口腔肿瘤不仅对抗癌治疗有更强的抵抗力， 其增殖、 侵袭的能力也随之上升， 导致癌灶向邻近组织浸润甚至发生远处转移。 临床上通常 使用多药联用的方法来克服肿瘤细胞对单一药物的耐药性。 然而， 肿瘤多药耐药性的出现 显著削弱了联合治疗策略的收益。 因此， 寻找具有抗口腔肿瘤作用的新型活性成分和开发 新型药物对口腔肿瘤的临床治疗及患者预后至 关重要。 miRNA作为治疗包括肿瘤在内的多 种人类疾病的候选药物类型之一， 是一类内生的、 长度约为20 ‑24个核苷 酸的小RNA， 其在人 体内具有多种重要的调节作用， 采用miRNA单独及联合治疗有望缓解或克服棘手的肿瘤的 耐药问题。 目前已有相关的临床研究， 但只局限于淋巴瘤、 黑色素等少量癌种。 [0003]自然杀伤细胞(Natural  Killer cells， NK细胞)来源于骨髓淋巴样干细胞， 可以 诱导病毒感染的细胞和肿瘤细胞的细胞溶解活性(无需预先敏化 或活化)。 NK ‑92是生长、 增 殖依赖于IL ‑2的人源性NK细胞株， NK ‑92MI是源自NK ‑92 细胞株、 经基因转染得到的IL ‑2非 依赖性NK细胞株。 两株人源性NK细胞株可以方便和经济地实现稳定、 大量、 长期扩增， 并已 被证实对很多 恶性肿瘤具有细胞毒性。 [0004]细胞外囊泡(Extr acellular  Vesicles， EVs)是由细胞释放的各种具有膜结构的 囊泡的统称。 科学家们最早于198 3年从绵羊网织红细胞中分离出携带亲本细胞成分的细胞 外囊泡， 并且广泛存在于体液中。 由于外泌体携带有核酸、 脂质等重要生物分子， 因此其在 癌症的早期诊断、 预后和治疗中具有巨大的临床应用潜力。 此外， 外泌体作为miRNA和治疗 剂转移至靶细胞的药物递送载体， 与合成载体相比， 这些纳米囊泡具有更高的安全性和稳 定性， 这为癌症治疗中的靶向药物输送提供了可能。 [0005]本发明利用两种 人源性NK细胞株NK ‑92和NK‑92MI作为获取NK细胞分泌的细胞外 囊泡的来源。 发明内容 [0006]鉴于上述背景技术， 本发明的目的是提供一种活性成分及其在制备治疗/  预防口说　明　书 1/11 页 3 CN 115381849 A 3