(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210747574.X (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 南京涵台余 生物科技有限公司 地址 210000 江苏省南京市栖霞区栖霞街 道广月路3 3-33号 (72)发明人 洪子涵　戴伟亮　 (51)Int.Cl. C07K 16/18(2006.01) C12N 5/09(2010.01) A61K 47/46(2006.01) A61K 31/167(2006.01) A61K 31/136(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 31/4745(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治 疗癌症中的用途 (57)摘要 本发明涉及外泌体以及提高药物敏感性的 抑制剂在 治疗癌症中的用途。 本发 明提供一种特 异性针对CK8的单克隆抗体， 该抗体能够显著的 提高肿瘤细胞的药物敏感。 将该CK8的单克隆抗 体与负载有化学药的外泌体一起使用后， 能够有 效的抑制肿瘤的增殖， 具有较好的应用前景和应 用价值。 权利要求书1页 说明书7页 序列表2页 附图2页 CN 115028720 A 2022.09.09 CN 115028720 A 1.一种CK8的单克隆抗体CK8 ‑4D13， 其特征在于该抗体的其轻链可变区序列和重链可 变区序列如下 所示： 所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 1所示， 所述轻链可变区的氨基酸序列如 SEQ ID NO： 2所示。 2.权利要求1所述的单克隆抗体CK8 ‑4D13在制备在制备治疗乳腺癌的药物中的应用， 其中， CK8的单 克隆抗体CK8 ‑4D13能够提高耐药乳腺癌细胞的药物敏感性。 3.权利要求1所述的CK8的单克隆抗体CK8 ‑4D13以及负载了化学抗癌药物的外泌体在 制备治疗乳 腺癌的药物中的应用， 其中， CK8的单克隆抗体CK8 ‑4D13能够提高耐药乳 腺癌细 胞的药物敏感性。 4.如权利要求3所述的应用， 所述外泌体是乳腺癌细胞培养液上清中分离制备的外泌 体， 所述负载是通过将等量外泌体与化学抗癌药混合， 通过电转的方法制备化学抗癌药负 载外泌体， 电击条件为电压400V， 电容125uF， 4mm电转杯进行电转， 随后用倒置离心超滤膜 过滤， 除去游离和非特异性结合的化学抗癌药。 5.如权利要求 4所述的应用， 所述 抗癌药为米托 蒽醌、 拓普替康或柔红霉素。 6.如权利要求1所述的CK8的单克隆抗体CK8 ‑4D13以及BCRP抑制剂在制备治疗乳腺癌 的药物中的应用， 其中， CK8的单克隆抗体CK8 ‑4D13和BCRP抑制剂联合使用后能够提高耐药 乳腺癌细胞的药物敏感性。 7.如权利要求6所述的应用， 所述药物为米托 蒽醌、 拓普替康或柔红霉素。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115028720 A 2外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治疗癌症中的用途 技术领域 [0001]本申请涉及 生物领域， 更具体的涉及外泌体以及 提高药物敏感性的抑制剂在治疗 癌症中的用途。 背景技术 [0002]根据世界卫生组织最新的数据， 乳腺癌已取代肺癌成为全球第一大肿瘤， 中国每 年大约新增乳腺癌患者42万人， 而且近年来年发病率每年递增 3％到4％。 乳腺癌综合治疗 的进步起到重要作用， 其中， 抗体药物是重要的治疗手段。 [0003]乳腺癌的分子靶向治疗， 最成功的莫过于针对HER ‑2过表达的转移性乳腺癌药物 曲妥珠单抗(赫赛汀)。 由罗氏旗下基因泰 克公司开发。 1998年9月FDA批准其用于HER ‑2过表 达转移性乳腺癌的治疗， 目前已成为一线 药物。 它使约1/4的顽固乳 腺癌患者得到挽救和生 命的延续， 2012年的销售额在 全球已达到68.39亿美元， 排名全球最畅销药物第 8名， 同时也 奠定了开发赫赛汀的罗氏公司在研发治疗HER ‑2乳腺癌抗体药物的霸主地位。 曲妥珠单抗 的新辅助治疗对乳腺癌有显著效果， 一项临床试验表明， 将曲妥珠单抗联合一线化疗药物 蒽环类、 环磷酰胺或紫杉醇， 与单用相同的化疗药物相比， 具有更好的效果并提高了存活 率， 使患者复发风险下降46％～52％， 死亡风险下降1/3 ‑53。 这种新 颖的辅助治疗 大大提高 了患者的生存质量。 2012年6月8日FDA批准其用于治疗HER ‑2阳性转移性乳腺癌， 由罗氏旗 下基因泰 克公司研发， 是继曲妥珠单抗之后的应用于临床的乳腺癌单克隆抗体， 是第1个被 称作HER二聚化抑制剂的单克隆抗体。 一项将曲妥珠单抗与帕妥珠单抗联用的临床试验正 在进行中， 随机分配8 08例HER‑2阳性转移 性乳腺癌患者， 对照组接受安慰剂、 曲妥 珠单抗加 紫杉醇， 而帕妥珠单抗组接受帕妥珠单抗、 曲妥珠单抗加紫杉 醇， 以此来评估无进展生存期 和总生存期。 帕妥 珠单抗组与对照组相比， 平均无进展生存期由12.4个月延长至l8.5个月， 结果证明帕妥珠单抗加曲妥珠单抗加紫杉 醇的组合作为HER ‑2阳性转移 性乳腺癌的一线治 疗可显著延长无进展生存期且不增加对心脏的毒副作用。 也有研究表明贝伐珠单抗和帕妥 珠单抗联用也有优于单药的效果。 HER ‑2作为一个乳腺癌的新兴靶点， 获得了众多 学者的青 睐， 纷纷将其作为乳腺癌药物开发的方向， 当然， 另辟蹊径寻找新的靶点 也颇为重要。 [0004]内分泌治疗是乳腺癌全身治疗的手段之一。 一部分内分泌治疗药物可以抑制减少 雌激素合成及跟乳腺癌细胞的结合， 从而阻断肿瘤信号传导途径， 导致癌细胞的死亡， 这在 降低乳腺癌复发和死亡风险中发挥重要作用， 进一步延长患者的生存时间。 但是这类药物 容易被代谢掉， 不利于 长期发挥作用。 [0005]细胞角蛋白(cytokeratin， CK)是一个最大的中间丝家族， 主要分布于上皮细胞 中， 是上皮细胞骨架的组成成分。 正常的不同类型上皮细胞显示特定的CK标记， 研究证实在 肿瘤发生时， 这些细胞仍然保留这种 标记特性。 因而CK是在肿瘤研究及病理鉴别诊断中得 到广泛应用的上皮标志物之一。 目前的研究表明， 通过抑制CK8的活性， 能够抑制癌细胞的 活性， 进而用于癌症的治疗。 [0006]近年来,关于外泌体递送药物的研究逐渐增多,一些小分子化学药物及基因药物说　明　书 1/7 页 3 CN 115028720 A 3