(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210750007.X (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 南通大学 地址 226019 江苏省南 通市崇川区啬园路9 号 (72)发明人 赵永梅　刘天庆　郑原林　 (74)专利代理 机构 南京经纬专利商标代理有限 公司 32200 专利代理师 黄欣 (51)Int.Cl. A61K 31/7068(2006.01) A61K 31/44(2006.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 包载吉西他滨和Triapine的碳酸钙纳米颗 粒 (57)摘要 本 发 明 公 开 了 一 种包 载 吉 西 他 滨 和 Triapine的碳酸钙纳米颗 粒， 属于生物医药技术 领域， 该碳酸钙纳米颗粒内包载有吉西他滨和 Triapine。 本发明通过一步法合成具有 生物安全 性/稳定性高的基于CaCO3的纳米颗粒GEM ‑ Triapine ‑CaCO3， 所获得的GEM ‑Triapine ‑CaCO3 产率高， 且 具有优异的生物相容性和分散性的特 性， 在肿瘤耐药性治 疗中具有巨大的潜力。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 115025109 A 2022.09.09 CN 115025109 A 1.一种碳酸钙纳米颗粒， 其特征在于： 所述碳酸钙纳米颗粒内包载有吉西他滨和 Triapine， 吉西他滨和Triapi ne 的摩尔比为1 1.14~1173： 1。 2.根据权利要求1所述的碳酸钙纳米颗粒， 其特征在于： 吉西他滨和Triapine  的摩尔 比为22.27~223： 1。 3.权利要求1所述的碳 酸钙纳米颗粒的制备 方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： 步骤一： 取吉西他滨、 Triapi ne和碳酸氢铵备用； 步骤二： 取氯化钙， 用甲醇溶解， 得到氯化钙的 甲醇溶液； 步骤三： 将 吉西他滨和Triapine加至氯化钙的甲醇溶液中， 将溶液封口并扎孔， 室温下 放入真空干燥箱， 再在混合溶液旁放置碳酸氢铵， 反应至体系出现明显的沉淀， 经离心机离 心后收集 沉淀， 得到所述 碳酸钙纳米颗粒。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于： 步骤一中， 吉西他滨的用量为10mg~ 20mg， Triapi ne的用量 为30 μg~60 μg。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于： 步骤二中， 氯化钙的用量为25mg~ 30mg， 甲醇的用量 为40mL~60mL。 6.根据权利 要求5所述的制备方法， 其特征在于： 步骤三中， 碳酸氢铵的用量为5g~10g， 反应时间为18h~24h。 7.权利要求1所述的碳 酸钙纳米颗粒在制备肿瘤治疗药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115025109 A 2包载吉西他滨和Triapine的碳酸钙纳米颗粒 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种包载吉西 他滨和Triapine的碳酸钙 纳米颗粒及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]胰腺导管腺癌 （PDAC） ， 通常称为胰腺癌。 在西方国家， 胰腺癌死亡率排名第四， 将 成为未来十年癌症死亡 的第二大原因。 由于缺 乏早期诊断和诊断后治疗效率低， 胰腺癌的 生存率非常低。 通常胰腺癌的治疗， 尤其是 晚期胰腺癌， 依赖于全身化疗， 但实际上PDAC患 者的整体预后仍然极差 。 [0003]吉西他滨 （GEM） 是一种广泛应用与治疗胰腺癌的亲水性脱氧胞苷类似物。 GEM  通 过阻断细胞复制的  G1/s 期来抑制  DNA 的合成。 与其他抗癌药物相比， 吉西他滨对胰腺癌 细胞更敏感， 但大多 数患者在开始治疗后数周内产生 耐药性， 导致存活率降低。 GEM  耐药的 机制与胰腺癌细胞调节生长、 增殖、 分化、 凋亡、 侵袭和血管生成的信号通路有关。 此外， 癌 症干细胞也参与了胰腺癌的化疗耐药性。 如何避免胰腺癌细胞 （PANC ‑1） 的耐药性是影响   GEM 治疗效果的主要问题。 核糖核苷 酸还原酶 （RR） 是一种催 化核糖核苷 酸形成脱 氧核糖核 苷酸的酶， 这些酶把核苷酸还原成脱氧核苷酸， 这是  DNA 复制和修复的重要过程之一。 这 种酶包含两个亚基， M1  (RRM1) 和 M2 (RRM2)， 有实验证明这两个亚基对胰腺癌的辅助治 疗有所影 响。 其中核糖核酸还原酶(RR)  的 M2(RRM2)的表达可促进  DNA 损伤修复和复制， 从而降低  GEM 的化疗敏感性， 因此抑制  RRM2 可能是增强化学疗法抗癌活性的有效手段。 [0004]Triapine  (3‑AP)， 是一种铁结合配体和抗癌药物， 是人类核糖核苷酸还原酶的抑 制剂(RnR)。 RnR  抑制剂通过大量消耗  DNTP， 从而选择性地使癌  细胞缺乏  DNA 合成和复 制所需的核苷 酸。 3‑AP通过还原铁配合物， 给予一个电子， 直接淬灭  M2 亚基上的酪氨 酸二 铁基， 从而抑制  RRM2 的表达。 但Triapi ne的水溶性差。 [0005]纳米级 CaCO3（nm） 是一种可以包载水不溶性药物的纳米载体。 纳米级  CaCO3具有 理想的生物相容性和生物降解性能并且在中性pH  值下稳定， 在酸性  PH 值下可分解为   Ca2+和CO2， 已被提出作为  pH 响应型药物输送系统， 用于输送化疗药物。 以纳 米级 CaCO3作 为药物载体， 将联用的药物包载， 能针对不同的药用机制和不同的癌症通路， 有望利用多种 抗癌方法的优点， 弥补不足之处， 从而实现更好的抗肿瘤治疗效果。 然而， 现在还缺少可靠 的方案。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一种同时包载吉西他滨 （GEM） 和Triapine （3 ‑AP） 的碳酸钙纳 米颗粒， 通过简捷的方法得到联用GEM和3 ‑AP的CaCO3纳米颗粒， 并将其应用于肿瘤的的耐 药性治疗。 [0007]为了实现上述目的， 本发明采用以下技 术方案： 一种碳酸钙纳米颗粒， 所述碳酸钙纳米颗粒内包载有吉西他滨和Triapine， 吉西说　明　书 1/5 页 3 CN 115025109 A 3