(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210743595.4 (22)申请日 2022.06.29 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114805581 A (43)申请公布日 2022.07.29 (73)专利权人 上海优替济生 生物医药有限公司 地址 201318 上海市浦东 新区半夏路10 0弄 4-5号 (72)发明人 赵阳兵　刘晓军　訾振国　朱庚振　 (74)专利代理 机构 上海弼兴律师事务所 31283 专利代理师 黄益澍 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01) G01N 33/68(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 47/68(2017.01)A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 114409782 A,202 2.04.29 CN 112521502 A,2021.0 3.19 CN 114573694 A,202 2.06.03 WO 2019178078 A1,2019.09.19 WO 2021207 770 A1,2021.10.14 WO 20141523 61 A1,2014.09.25 荆琳 等.“抗IL-12Rα2单 克隆抗体轻链和 重链可变区基因的克隆及鉴定 ”. 《细胞与分子免 疫学杂志》 .2012,第28卷(第9期),第964-967页. 邹存义 等.“IL-13Rα2及I L-13在胶质瘤发 生发展及治 疗中的研究进 展”. 《转化医学电子杂 志》 .2017,第4卷(第7期),第23 -32页. Chang Xu et al. .“IL-13Rα2 human ized scFv-based CAR-T cel ls exhibit therapeutic activity a gainst glioblastoma ”. 《Molecular Therapy: Oncolytics》 .202 2,第24卷4 43-451. 审查员 陈阜 (54)发明名称 靶向IL13RA2的抗体、 嵌合抗原受体及其用 途 (57)摘要 本发明公开了一种靶向IL13RA2的抗体、 嵌 合抗原受体及其用途。 所述靶向IL13RA2的抗体 包含重链可变区和轻链可变区， 所述重链可变区 包含HCDR1、 HCDR2和HCDR3， 所述轻链可变区包含 LCDR1、 LCDR2和LCDR3。 本发明还公开了所述抗体 的制备方法， 包含所述抗体的嵌合抗原受体， 编 码其的核酸、 重组表达载体、 转化体， 抗体药物偶 联物， 药物组合物， 试剂盒和套装药盒， 和它们的 应用。 本发明提供的抗IL13RA2抗体只针对 IL13RA2高表达细胞有杀伤， 具有很好的特异性 和安全性。 权利要求书3页 说明书11页 序列表13页 附图5页 CN 114805581 B 2022.10.14 CN 114805581 B 1.一种靶向IL13RA2的抗体或其抗原结合片段， 其包含重链可变区和轻链可变区， 所述 重链可变区包含HCD R1、 HCDR2和HCD R3， 所述轻链可变区包含LCD R1、 LCDR2和LCD R3， 其特征 在于， 所述HCDR1的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 14所示， 所述HCDR2的氨基酸序列如SEQ  ID  NO: 15所示， 所述HCDR3 的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 16所示， 所述LCDR1的氨基酸序列如 SEQ ID NO: 8所示， 所述LCDR2的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 9所示， 所述LCDR3的氨基酸序 列如SEQ ID NO: 10所示。 2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述重链可变区的框架区 为人源框架区； 所述轻链可变区的框架区为人源框架区。 3.如权利要求2所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述重链可变区的氨基酸 序列如SEQ  ID NO: 22所示， 和所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 21所示。 4.如权利要求2所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体满足以下三项中 的一项或多 项： （1） 所述 抗体为全长抗体、 Fab、 Fab ’、 F(ab’)2或Fv； （2） 所述 抗体为单 特异性抗体； （3） 所述 抗体为单 克隆抗体。 5.如权利要求4所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述Fv为scFv， 所述scFv 的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 23所示。 6.如权利要求4所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 当所述抗体为全长抗体 时， 其包括源自人源抗体的重链的重链恒定区， 和源自人源抗体的κ链或者λ链的轻链恒定 区。 7.一种嵌合抗原受体， 其特征在于， 其包含如权利要求1~3或5任一项所述的靶向 IL13RA2的抗体或其 抗原结合片段。 8.如权利要求7所述的嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述嵌合抗原受体还包括CD8信号 肽、 铰链区、 穿膜区、 胞内信号 域4‑1BB和CD3ζ 区域。 9.如权利要求8所述的嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述嵌合抗原受体从N末端至C末端 依次为： CD8信号肽、 靶向IL13RA2的抗体或其抗原结合片段、 铰链区、 穿膜区、 胞内信号域4 ‑ 1BB和CD3ζ 区域。 10.如权利要求9所述的嵌合 抗原受体， 其特 征在于， 所述 穿膜区为CD 8穿膜区。 11.如权利要求9所述的嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述CD8信号肽的氨基酸序列如 SEQ ID NO: 25所示； 和/或， 所述铰链区的氨基酸序列SEQ  ID NO: 27所示； 和/或， 所述穿 膜区的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 29所示； 和/或， 所述胞内信号域4 ‑1BB的氨基酸序列如 SEQ ID NO: 31所示； 和/或， 所述CD3ζ 区域的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 33所示。 12.如权利要求11所述的嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述CD8信号肽的核苷酸序列如 SEQ ID NO: 26所示； 和/或， 所述铰链区的核苷酸序列如SEQ  ID NO: 28所示； 和/或， 所述 穿膜区的核苷酸序列如SEQ  ID NO: 30所示； 和/或， 所述胞内信号域4 ‑1BB的核苷酸序列如 SEQ ID NO: 32所示； 和/或， 所述CD3ζ 区域的核苷酸序列如SEQ  ID NO: 34所示。 13.一种分离的核酸， 其特征在于， 其编码如权利 要求1~6任一项所述的靶向IL13RA2的权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114805581 B 2抗体或其 抗原结合片段， 或编码如权利要求7~12任一项所述的嵌合 抗原受体。 14.如权利要求13所述的核酸， 其特征在于， 编码所述靶向IL13RA2的抗体或其抗原结 合片段的核苷酸序列如SEQ  ID NO: 24所示。 15.一种重组表达载体， 其特 征在于， 其包 含如权利要求13或14所述的分离的核酸。 16.如权利要求15所述的重组表达载体， 其特征在于， 所述重组表达载体为质粒、 噬菌 体或病毒载体。 17.如权利要求16所述的重组表达载体， 其特征在于， 所述病毒载体为逆转录病毒载 体、 慢病毒载体、 腺病毒载体或腺相关病毒载体， 所述质粒为粘粒。 18.一种转 化体， 其特 征在于， 其包 含如权利要求15~17任一项所述的重组表达载体。 19.如权利要求18所述的转化体， 其特征在于， 所述转化体的宿主细胞为原核细胞或真 核细胞。 20.如权利要求19所述的转化体， 其特征在于， 所述真核细胞为酵母细胞或哺乳动物细 胞。 21.如权利要求20所述的转化体， 其特征在于， 所述哺乳动物细胞为293T细胞或CHO细 胞。 22.一种基因修饰的细胞， 其特征在于， 其包含如权利要求7~12任一项所述的嵌合抗原 受体。 23.如权利要求2 2所述的细胞， 其特 征在于， 所述基因修饰的细胞为真核细胞。 24.如权利要求23所述的细胞， 其特 征在于， 所述真核细胞为分离的人细胞。 25.如权利要求24所述的细胞， 其特 征在于， 所述细胞为免疫细胞。 26.如权利要求25所述的细胞， 其特 征在于， 所述免疫细胞为T细胞。 27.一种靶向IL13RA2的抗体或其抗原结合片段的制备方法， 其特征在于， 其包含以下 步骤： 培养如权利要求18~21任一项所述的转化体， 从培养物 中获得靶向IL13RA2的抗体或 其抗原结合片段。 28.一种抗体药物偶联物， 其特征在于， 其包含细胞毒性剂 或标签， 以及如权利要求1~6 任一项所述的靶向I L13RA2的抗体或其 抗原结合片段。 29.如权利要求28所述的抗体药物偶联物， 其特征在于， 所述细胞毒性剂为MMAF或 MMAE， 所述标签为 荧光剂。 30.一种药物组合物， 其特征在于， 其包含如权利 要求1~6任一项所述的靶向IL13RA2的 抗体或其抗原结合片段、 如权利要求22~26任一项 所述的基因修饰的细胞和/或如