(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210744911.X (22)申请日 2022.06.29 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114835780 A (43)申请公布日 2022.08.02 (73)专利权人 中国农业大 学 地址 100094 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 赵靓　廖小军　王凤章　王永涛　 饶雷　 (74)专利代理 机构 北京清亦华知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11201 专利代理师 赵静 (51)Int.Cl. C07K 7/06(2006.01) C07K 1/14(2006.01)C07K 1/18(2006.01) C07K 1/20(2006.01) C12P 21/06(2006.01) A61K 38/08(2019.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) A23L 33/18(2016.01) (56)对比文件 CN 101291683 A,20 08.10.22 CN 1659276 A,20 05.08.24 WO 2006096392 A2,2006.09.14 CN 102174546 A,201 1.09.07 CN 102408470 A,2012.04.1 1 审查员 邱棋 (54)发明名称 辣椒籽分离的寡肽MEDEI及其在预防或治疗 癌症中的应用 (57)摘要 本发明提出了辣椒籽分离的寡肽MEDEI及其 在预防或治疗癌症中的应用， 该寡肽由辣椒籽中 分离获取， 具有抗肿瘤作用， 尤其是可 以有效地 抑制HepG2细胞生长代谢， 应用前 景好。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图1页 CN 114835780 B 2022.09.27 CN 114835780 B 1.一种分离的寡肽， 其特 征在于， 所述分离的寡肽的氨基酸序列为SEQ  ID NO： 1。 2.根据权利要求1所述的分离的寡肽， 其特 征在于， 所述分离的寡肽来源于辣椒 籽。 3.一种核酸分子， 其特 征在于， 所述核酸分子编码权利要求1或2所述分离的寡肽。 4.一种构建体， 其特 征在于， 含有权利要求3所述核酸分子 。 5.一种重组细胞， 其特征在于， 所述重组细胞含有权利要求3所述核酸分子或权利要求 4所述构建体。 6.一种药物， 其特征在于， 包括： 权利要求1或2所述分离的寡肽、 权利要求3所述核酸分 子或权利要求5所述重组细胞。 7.权利要求1或2所述分离的寡肽、 权利要求3所述核酸分子或权利要求5所述重组细胞 在制备药物中的用途， 其特 征在于， 所述药物用于预防或治疗肝癌。 8.一种获得权利要求1或2所述分离的寡肽的方法， 其特 征在于， 包括： 对辣椒籽进行处 理， 得到所述分离的寡肽。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特 征在于， 包括： （1） 将辣椒 籽进行粉碎， 得到辣椒 籽粉； （2） 对所述 辣椒籽粉进行脱脂处 理， 得到脱脂后的辣椒 籽粕； （3） 提取 所述脱脂后的辣椒 籽粕中的蛋白， 得到粗蛋白提取物； （4） 将所述 粗蛋白提取物进行酶解处 理， 然后灭酶， 得到酶解蛋白溶 液； （5） 对所述酶解蛋白溶 液进行分离纯化， 得到所述分离的寡肽。 10.根据权利要求9所述的方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 将所述辣椒籽进行粉碎后通 过60~100目筛， 得到截留物和透过物， 收集透过物， 得到辣椒 籽粉； 步骤 （2） 中， 所述脱脂处 理采用的脱脂溶剂为 正己烷； 步骤 （3） 包括： 将所述脱脂后的辣椒籽粕与水混合， 所得混合液用碱液调节pH值至9~ 10， 反应3~5小时， 再调节反应液的pH值至4~5， 反应1~3小时， 将反应液离心， 收集沉淀， 得到 粗蛋白提取物； 步骤 （4） 中进行 所述酶解处 理之前， 预 先将所述 粗蛋白提取物进行超高压处 理； 所述超高压处 理的压力为10 0~400MPa， 时间为20~40分钟； 所述酶解处 理的温度为3 0~50℃， 时间为1~5小时， pH值 为7~10； 所述酶解处 理采用的酶选自碱性蛋白酶， 所述酶与所述 粗蛋白的质量比为1:20~1:50； 所述灭酶是在90℃~100℃进行1~10min； 步骤 （5） 中， 所述分离纯化是采用色谱柱进行的， 所述色谱柱为阴离子色谱柱和疏水型 色谱柱； 当采用阴离子色谱柱时， 采用的流动相 包括水和NaCl； 当采用疏水性色谱柱时， 采 用的流动相包括水和40~60v/v%的甲醇溶液。 11.根据权利要求9或10所述的方法， 其特征在于， 所述酶解处理采用的酶选自地衣芽 孢杆菌； 步骤 （5） 中， 所述分离纯化包括： 将所述酶解蛋白溶 液注入阴离 子色谱柱中， 流动相洗脱， 收集3 5~45min内的流出 液； 将所述流出液注入疏水性色谱柱中， 流动相洗脱， 收集75~90min内的流出液， 以便得到 含有所述寡肽的纯化产物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114835780 B 2辣椒籽分离的寡肽MEDEI及其在预防或治疗癌症中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物领域。 具体地， 本 发明涉及辣椒籽分离的寡肽MEDEI及其在预防或 治疗癌症中的应用。 背景技术 [0002]辣椒， 茄科辣椒属草本植物， 原产于墨西哥， 后传入中国， 现主要分布于四川、 云 南、 贵州、 湖南、 河南等地种植。 辣椒主要由辣椒果肉和辣椒籽组成， 辣椒籽占辣椒干重的 30%‑60%， 是辣椒加 工过程中的主要副产物。 辣椒籽含有丰富的膳食纤维、 脂肪、 蛋白质、 矿 物质和维生素E等， 具有极佳的营养经济价 值。 [0003]随着我国辣椒加工业的快速发展， 辣椒在食品、 医药、 化工等领域均有应用， 食品 领域中干辣椒、 辣椒酱、 辣椒粉、 火锅底料等辣椒产品越来越多， 辣椒碱在医药中的应用也 很广泛， 辣椒加工过程中会产生大量的废弃辣椒籽。 目前我国的辣椒籽少 部分作为动物饲 料， 但大部 分都未经有效利用被当作废弃物处理， 造成环境污染和资源浪费。 辣椒籽产量较 多， 价格低廉、 容易 获取， 并且饼粕蛋白中氨基酸齐全， 必需氨基酸含量适中， 是一种优质的 蛋白资源。 因此从辣椒籽中提取生物活性肽既可 “变废为宝 ”， 提高资源利用率， 又可减少污 染， 符合环境友好型 社会的发展目标。 [0004]目前， 抗肿瘤药物如氟尿嘧啶、 顺铂、 柔红霉素等在肿瘤治疗中发挥着重要作用， 但是这些药物的安全性、 有效性、 及价格昂贵等使其临床 应用性受到限制。 越来越多的研究 表明来自天然食物或动植物的生物活性肽 对人体健康有着积极的作用。 生物活性肽的生理 活性功能主要体现在抗菌、 抗病毒、 抗氧化、 抗肿瘤、 降血糖、 降血压、 降胆固醇、 免疫调节 等 方面， 动物源活性肽存在着成本高、 安全性等问题， 而植物源活性肽因其纯天然、 营养价值 高得到广泛应用， 如大豆活性肽、 花生活性肽、 菜籽活性肽等， 但是辣椒籽中活性肽研究尚 少。 发明内容 [0005]本发明旨在至少在一定程度上解决现有技 术中存在的技 术问题至少之一。 [0006]在本发明的一个方面， 本发明提出了一种分离的多肽。 根据本发明的实施例， 所述 分离的寡肽具有如S EQ ID NO： 1所示的氨基酸序列或其功能类似物， 具体地， 所述分离的寡 肽的氨基酸序列为MEDEI （Met ‑Glu‑Asp‑Glu‑IlE， SEQ ID NO： 1） 。 发明人 从辣椒籽中分离获 得了上述寡肽， 并对其功能进行研究， 发现其具有抗肿瘤作用， 尤其是可以有效地抑制 HepG2细胞生长代谢， 应用前 景好。 [0007]根据本发明的实施例， 所述分离 的寡肽来源于辣椒籽。 发明人提取辣椒籽中的蛋 白， 意外发现了上述具有抗肿瘤作用的寡肽。 [0008]在本发明的另一方面， 本发明提出了一种核酸分子。 根据本发明的实施例， 所述核 酸分子编码前面所述分离的寡肽。 根据本发明实施例的核酸分子在导入受体细胞后， 在适 于蛋白表达的环境下， 表达前面所述的分离的寡肽， 该寡肽具有抗肿瘤作用。说　明　书 1/4 页 3 CN 114835780 B 3