(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210750853.1 (22)申请日 2022.06.30 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114805584 A (43)申请公布日 2022.07.29 (73)专利权人 上海优替济生 生物医药有限公司 地址 201318 上海市浦东 新区半夏路10 0弄 4-5号 (72)发明人 赵阳兵　刘晓军　王杰　 (74)专利代理 机构 上海巅石知识产权代理事务 所(普通合伙) 31309 专利代理师 游琦　张琤 (51)Int.Cl. C07K 16/32(2006.01) C07K 19/00(2006.01)C12N 15/13(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 15/85(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 112262156 A,2021.01.2 2 CN 10146 3344 A,2009.06.24 WO 2019098682 A1,2019.0 5.23 US 2011256056 A1,201 1.10.20 陈观平等.重组抗 H ER2 人源化单 克隆抗体 大规模制备及活性 鉴定方法学建立. 《中国药理 学通报》 .2021,第37 卷(第6期), 审查员 梁韶 (54)发明名称 抗原结合蛋白及其用途 (57)摘要 本申请涉及一种抗原结合蛋白及其用途， 所 述抗原结合蛋白包含VH和VL， 其中所述VH包含 HCDR1， HCDR2和HCDR3， 所述HCDR1包含SEQ  ID  NO:10所示的氨 基酸序列， 所述HCDR2包含SEQ  ID  NO:12所示的氨 基酸序列， 所述HCDR3包含SEQ  ID  NO:14所示的氨基酸序列； 其中所述VL包含 LCDR1， LCDR2和LCDR3， 所述LCDR1包含SEQ  ID  NO:2所示的氨基酸序列， 所述LCDR2包含SEQ  ID  NO:4所示的氨基酸序列， 所述LCDR3包含SEQ  ID  NO:6所示的氨基酸序列。 本申请 还涉及包含所述 原结合蛋白的药物组合物及其治 疗癌症的用途。 权利要求书2页 说明书22页 序列表16页 附图12页 CN 114805584 B 2022.09.09 CN 114805584 B 1.分离的抗原结合蛋白， 其结合HER2且包含VH和VL， 其中所述VH包含HCDR1， HCDR2和 HCDR3， 所述HCD R1的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 10所示， 所述HCDR2的氨基酸序列如SEQ  ID  NO: 12所示， 所述HCDR3的氨 基酸序列如SEQ  ID NO: 14所示； 其中所述VL包含LCDR1， LCDR2 和LCDR3， 所述LCDR1的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 2所示， 所述LCDR2的氨基酸序列如SEQ  ID  NO: 4所示， 所述 LCDR3的氨基酸序列如SEQ  ID NO: 6所示。 2.根据权利 要求1所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含VH和VL， 其中所述VH包含SEQ  ID  NO: 22所示的氨基酸序列， 所述VL包 含SEQ ID NO: 21所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白， 其包括 抗体或其 抗原结合片段。 4.根据权利要求3所述的分离的抗原结合蛋白， 其中所述抗体或其抗原结合片段包括 单克隆抗体， 多克隆抗体， 嵌合抗体， 人源化抗体， 全人源抗体， Fab， Fab ’， Fv片段， F(ab ’)2， scFv和/或di ‑scFv。 5.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白， 所述的分离的抗原结合蛋白包括scFv， 其中所述VH和VL 通过接头连接。 6.根据权利要求5所述的分离的抗原结合蛋白， 其中所述接头包含SEQ  ID NO: 8所示 的氨基酸序列。 7.根据权利 要求1所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含SEQ  ID NO: 23所示的氨基酸序 列。 8.免疫缀 合物， 其包 含权利要求1 ‑7中任一项所述分离的抗原结合蛋白。 9.嵌合抗原 受体， 其包含胞外抗原结合结构域、 跨膜域和胞内信号转导结构域， 其中所 述胞外抗原结合结构域包 含权利要求1 ‑7中一项所述的分离的抗原结合蛋白。 10.根据权利要求9所述的嵌合抗原 受体， 其中所述跨膜域包含源自选自下组中的一种 或多种蛋白的跨膜域： CD8、 CD28、 CD3 ε  (CD3e)、 4 ‑1BB、 CD4、 CD27、 CD7、 PD ‑1、 TRAC、 TRBC、 CD3 ζ、 CTLA‑4、 LAG‑3、 CD5、 ICOS、 OX40、 NKG2D、 2B4、 CD244、 FcεRIγ、 BTLA、 CD30、 GITR、 HVEM、 DAP10、 CD2、 NKG2C、 LIGHT、 DAP12， CD40L  (CD154)、 TIM1、 CD226、 DR3、 CD45、 CD80、 CD86、 CD9、 CD16、 CD2 2、 CD33、 CD37、 CD64、 SLAM及它 们的变体。 11.根据权利要求9所述的嵌合抗原受体， 其中所述跨膜域包含SEQ  ID NO: 17所示的 氨基酸序列。 12.根据权利要求9所述的嵌合抗原 受体， 其中所述胞内信号转导结构域包含源自选自 下组中的一种或多种蛋白的胞内信号转导结构域： CD3ζ、 CD3δ、 CD3γ、 CD3ε、 CD79a、 CD79b、 FceRIγ、 FceRIβ、 FcγRIIa、 牛白血病病毒gp30、 Epstein ‑Barr病毒(EBV)LMP2A、 猿免疫缺 陷病毒PBj14  Nef、 DAP10、 DAP ‑12和至少包 含一个ITAM的结构域。 13.根据权利要求9所述的嵌合抗原受体， 其中所述胞内信号转导结构域包含SEQ  ID  NO: 19所示的氨基酸序列。 14.根据权利要求9所述的嵌合抗原 受体， 其中所述嵌合抗原 受体还包含胞内共刺激信 号传导结构域， 所述胞内共刺激信号传导结构域包含源自选自下组中的一种或多种蛋白的 胞内共刺激信号传导结构域： CD28、 4 ‑1BB (CD137)、 CD27、 CD2、 CD7、 CD8A、 CD8B、 OX40、 CD226、 DR3、 SLAM、 CDS、 ICAM ‑1、 NKG2D、 NKG2C、 B7 ‑H3、 2B4、 Fc εRIγ、 BTLA、 GITR、 HVEM、 DAP10、 DAP12、 CD30、 CD40、 CD40L、 TIM1、 PD ‑1、 LFA‑1、 LIGHT、 JAML、 CD244、 CD100、 ICOS、 MyD88及它们 的变体。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114805584 B 215.根据权利要求14所述的嵌合抗原受体， 其中所述胞内共刺激信号传导结构域包含 SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列。 16.根据权利要求14所述的嵌合抗原受体， 由N端至C端， 所述嵌合抗原受体依次包含胞 外抗原结合结构域、 跨膜域、 胞内共刺激信号传导结构域和胞内信号传导结构域。 17.根据权利要求9所述的嵌合抗原 受体， 其中所述跨膜域与 所述胞外抗原结合结构域 之间还包含间隔子， 所述间隔子包含源自选自下组中的一种或多种蛋白的铰链区： CD28、 CD8、 IgG1、 IgG4、 IgD、 4 ‑1BB、 CD4、 CD27、 CD7、 CD8A、 PD ‑1、 ICOS、 OX40、 NKG2D、 NKG2C、 Fc εRIγ、 BTLA、 GITR、 DAP10、 TIM1、 SLAM、 CD3 0、 LIGHT及它 们的变体。 18.根据权利 要求17所述的嵌合抗原受体， 所述间隔子包含SEQ  ID NO: 16所示的氨基 酸序列。 19.根据权利要求17所述的嵌合抗原受体， 由N端至C端， 所述嵌合抗原受体依次包含胞 外抗原结合结构域、 间隔子、 跨膜域、 胞内共刺激信号传导结构域和胞内信号传导结构域。 20.根据权利要求19所述的嵌合抗原受体， 由N端至C端， 所述嵌合抗原受体的间隔子、 跨膜域、 胞内共刺激信号传导结构域和胞内信号传导结构域包含SEQ  ID NO: 24所示的氨 基酸序列。 21.根据权利要求9所述的嵌合抗原受体， 所述嵌合抗原受体还包含信号肽片段， 所述 信号肽片段的C端与所述胞外抗原结合结构域的N端连接 。 22.根据权利 要求21所述的嵌合抗原受体， 所述信号肽片段包含SEQ  ID NO: 20所示的 氨基酸序列。 23.根据权利要求9所述的嵌合抗原受体， 所述嵌合抗原受体包含SEQ  ID NO: 25所示 的氨基酸序列。 24.分离的核酸分子， 其包含编码权利要求1 ‑7中任一项所述的抗原结合蛋白或编码权 利要求9‑23中任一项所述的嵌合 抗原受体的核苷酸序列。 25.构建体， 其包 含权利要求24所述的核酸分子 。 26.细胞， 其包含权利要求24所述的核酸分子或权利要求25所述的构建体， 和/或表达 权利要求9 ‑23中任一项所述的嵌合 抗原受体。 27.根据权利要求26所述的细胞， 其中所述细胞包括免疫效应细胞。 28.根据权利 要求27所述的细