(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221075843 6.1 (22)申请日 2022.06.30 (71)申请人 复旦大学 地址 200043 上海市杨 浦区邯郸路2 20号 (72)发明人 曹纬倩　孔思远　蒋碧云　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 陈月霞 (51)Int.Cl. G01N 33/68(2006.01) G01N 33/574(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种L1CA M蛋白N979位点特异性核心岩藻糖 基化的抑制剂的应用 (57)摘要 本发明公开了一种L1CAM蛋白N979位点特异 性核心岩藻糖基化的抑制剂的应用， 涉及生物医 药技术领域。 一种检测L1CAM蛋白N979位点特异 性核心岩藻糖基化水平的试剂在制备诊断肝癌 转移可能性的产品中的应用。 本发 明还提供一种 L1CAM蛋白N979位点特异性核心岩藻糖基化的抑 制剂在制备治疗肝癌的药物中的应用。 本发明研 究发现可通过检测L1CA M蛋白N979位点特异性核 心岩藻糖基化水平预测肝癌转移的可能性。 本发 明针对L1CA MN979位点及该位点糖基化修饰设计 了一种siRNA， 可以通过使 L1CAM蛋白N979位点特 异性核心岩藻糖基化下调， 从而抑制肝癌细胞转 移。 权利要求书1页 说明书12页 序列表4页 附图7页 CN 115078738 A 2022.09.20 CN 115078738 A 1.一种检测L1CAM蛋白N979位点特异性核心岩藻糖基化水平的试剂在制备诊断肝癌转 移可能性的产品中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述L1CAM蛋白N979位点特异性核心岩藻 糖基化水平上调， 肝癌转移可能性增 加。 3.一种L1CAM蛋白N979位点特异性核心岩藻糖基化的抑制剂在制备治疗肝癌的药物中 的应用。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述抑制剂为如SEQ  ID NO.1‑2所示的 siRNA。 5.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述药物为抑制肝癌转移的药物。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述抑制肝癌转移是通过抑制FUT8的表达 实现。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115078738 A 2一种L1CAM蛋白N979位点特异性核心岩藻糖基化的抑制剂的 应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 特别是涉及一种L1CAM蛋白N979位点特异性核心 岩藻糖基化的抑制剂的应用。 背景技术 [0002]L1CAM(CD171)是免疫球蛋白(Ig)超家族的200 ‑220kDa跨膜高度糖基化蛋白， 由六 个Ig样结构域和五个纤连蛋白III型重复序列组成， 构成一个跨膜区和一个高度保守的细 胞质尾部。 L1CAM拥有21个潜在的N ‑糖基化位点， 位于外域的Ig结构域和FNIII结构域。 L1CAM是神经细胞粘附分子(CAM)L1家族密切相关的原型成员。 该家族包括脊椎动物中的四 个不同成员： L1CAM、 L1的密切同源物(CHL1)、 NrCA M和Neurofascin。 虽然最初在小鼠中鉴定 发现， 但同源蛋白存在于人类(L1CAM)、 鸡(NgCAM)、 大鼠(NILE)和果蝇(Neuroglian)中。 L1CAM因其在神经发育中的作用而广为人知。 已知作用包括调节神经树突生长、 成束、 细胞 粘附、 细胞迁移、 髓鞘形成和细胞存活等过程。 除神经系统之外， 研究也揭示了L 1CAM在胶质 瘤、 黑色素瘤、 卵巢癌、 结肠癌、 胰腺癌和肝癌中的异常表达。 肿 瘤细胞利用L1CAM调节细胞 粘附、 迁移的作用来增强细胞的迁移侵袭能力。 而这些作用主要取决于L1CAM可以以顺式 (在同一质膜 内)或反式(在相邻细胞上)与各种分子相互结合。 L1CAM能够与自身(同源性) 或异源性与其他神经细胞粘附分子、 整合素、 CD24、 neurocan和神经纤毛蛋白结合。 L1CAM的 细胞质尾部可以与细胞骨架 蛋白锚蛋白、 肌动蛋白、 血影蛋白和ezrin蛋白相互作用， 它们 通过内吞作用控制其在膜上的表达， 介导与细胞骨架的相互作用， 并激活下游信号通路。 除 了作用于膜结合通路外， L1CAM蛋白受几类酶介导而裂解。 这几类蛋白酶包括解聚素和金属 蛋白酶10(ADA M10)、 ADAM17或基质金属蛋白酶16(MMP ‑16)、 β‑分泌酶1(B ACE1)、 纤溶酶和髓 鞘碱性蛋 白(MBP)。 纤溶酶在第三个FNIII结构域内的两个位点K842或K845上进行切割， 产 生140kDa的可溶性片段和80kDa的细胞内片段。 而BA CE1在Y1086和E1087之间切割L1cam， 产 生约180kDa的可溶性片段， 其中包含 大部分细胞外结构域， 包括所有Ig结构域和五个FNIII 结构域。 ADAM10和ADAM17裂解L1CAM的位置邻近于跨膜结构域的BACE1裂解位点。 纤溶酶的 切割会损害L1CAM促进血管共同选择和转移性生长的能力。 而ADAM10裂解生成的可溶性 L1CAM片段促进了癌细胞的侵 袭或迁移。 [0003]肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝癌类型， 与预后不良有 关。 它是肝硬化患者最 常见的死亡原因， 并且在不同的研究中被证明是全球癌症相关死亡 的第三大常见原因。 每 年， 大约有50万人被诊断出患有HCC。 近几十年来， 由于早期诊断和治疗的病例越来越多， HCC患者的预后得到了改善， 但 肝外转移 仍是预后不良的因素。 晚期肝细胞癌最常见的转移 部位是肺(44％)， 门静脉(35％)和门静脉淋巴结(27％)。 此外， 腹内淋巴结和骨骼也是常见 部位。 这些转移通常发现于肿瘤晚期阶段。 转移性肝癌在很大程度上仍然是一种 无法治愈 的疾病。 确定肝癌转移的决定性因素是有效控制肿瘤进展的关键步骤。 异常糖基化通常被 视为癌症的标志， 不仅是结果， 也是恶性表型的驱动因素， 是直接影响肿瘤进展和转移的关说　明　书 1/12 页 3 CN 115078738 A 3