(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210771514.1 (22)申请日 2022.06.30 (71)申请人 曲阜师范大学 地址 273165 山东省济宁市曲阜市 静轩西 路57号 (72)发明人 公培伟　崔慧迎　刘哲　李诚　 赵凯　李娟　宋绍华　王丹丹　 (74)专利代理 机构 山东知圣律师事务所 37262 专利代理师 陈晓辉 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/58(2017.01) A61K 38/44(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61P 35/00(2006.01)B82Y 5/00(2011.01) (54)发明名称 一种具有抗癌活性的双酶纳米药物及其制 备方法与应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一 种具有抗癌活性的双酶纳米药物及其制备方法 与应用。 具体为将用于 饥饿治疗的葡萄糖氧化酶 （GOx） 和金纳米颗 粒同时负载到 金属有机框架材 料UiO‑66表面， 修饰后的U iO‑66可以在水中有较 好和较长时间的分散性， 有效的避免了金纳米颗 粒的再聚集， 实现了GOx和金纳米颗粒的有效负 载和均匀负载， 发挥了GOx和金纳米酶的双重酶 活性， 并且可以使GOx和金纳米颗粒的长久且稳 定的保持活性， 进而增强饥饿治疗的效果， 同时 利用金纳米颗粒良好的光热性能和金属对细胞 特有的毒性， 负载后的纳米递药系统具有优异的 饥饿和光热协同治疗性能， 具有显著的抗癌性 能， 显著降低了癌细胞的存活率。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 115089730 A 2022.09.23 CN 115089730 A 1.一种具有抗癌活性的双酶纳米药物， 其特征在于， 所述纳米药物具体是金属有机框 架UiO‑66表面同时负载G Ox和金纳米颗粒的双酶纳米药物UiO ‑66@GOx@Au。 2.根据权利要求1所述的纳米药物， 其特征在于， 所述的双酶纳米药物UiO ‑66@GOx@Au 的粒径为10～40 0nm。 3.一种制备所述双酶纳米药物UiO ‑66@GOx@Au的方法， 其特征在于， 具体包括如下步 骤： (1)将UiO ‑66加入去离子水中超声均匀后， 与GOx相混合， 将混合液超声后进行搅拌反 应， 得到UiO ‑66@GOx混合物， 将UiO ‑66@GOx混合物进行离心分离后得到产物UiO ‑66@GOx； (2)将UiO ‑66@GOx与Au@PVP溶液混合超声处理， 搅拌反应， 离心后， 用去离子水多次清 洗离心后， 得到产物UiO ‑66@GOx@Au。 4.根据权利 要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中UiO ‑66与GOx在混合溶液中 的浓度比为1:1～ 2。 5.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中混合搅拌过程的转速为50 ～100r/min， 时间为6 080min， 温度为25～37℃。 6.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中UiO ‑66@GOx与Au@PVP溶液 的在混合溶 液中的浓度比为1:0.25～1。 7.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)所述UiO ‑66@GOx与Au@PVP溶 液混合超声的功率 为300～400W， 超声时间为5～10mi n。 8.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)所述混合搅拌的速率为50～ 200r/min， 搅拌时间为 4～6h， 温度为室温。 9.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的Au@PVP溶液通过如 下方法制备： 将HAuCl4·4H2O和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶解于超纯水中， 在90℃， 300r/min搅拌速率 下进行搅拌， 至溶液达90℃后， 快速加入NaBH4溶液， 保持90℃搅拌10min后， 将溶液放置常 温直至冷却， 得到Au@PVP溶 液。 10.一种双酶纳米药物UiO ‑66@GOx@Au在制备治疗癌症的药物或用于构建癌症治疗 的 体系中的应用， 所述治疗体系为具有饥饿治疗和光热转换多重抗癌效果治疗体系。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115089730 A 2一种具有抗癌活性的双酶纳米药物及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及 一种具有抗癌活性的双酶纳 米药物及制 备方法与应用。 背景技术 [0002]癌症被称作世界五大绝症之一， 在中国每天超一万的人被诊断出癌症， 而癌症的 治疗一直是困扰医学界的一道难题。 癌症有很多治疗方法， 包括手术治疗、 放射治疗、 化学 药物治疗等， 而这些治疗手段往往不能完全清除癌细胞或对正常细胞造成损伤。 纳米药物 载体具有较小的副作用和良好的生物相容性， 靶向修饰后能准确将药物递送到癌细胞； 可 延长药物在体内的消除半衰期， 提高药效时间； 此外也能联合光动力疗法、 光热疗法、 光敏 疗法多种治疗手段更好的抵制癌细胞的增殖， 达到更好的治疗效果。 金属有机框架(MOFs) 是一种新型 的多孔纳米晶体材料， 由金属离子或金属团簇和某些有机连接体 自组装合成。 MOFs具有有序的内部结构和特定的外部形貌， 具有孔隙率高、 表面积大、 尺寸外貌可调、 功 能可修饰化、 化学/物理高稳定性等特点， 在吸附、 传感、 催 化、 负载等领域有着广泛的应用， 而锆基MOFs尤其是UiO ‑66其孔径的可制定化、 生物相容性、 表面可修饰性、 高药物容量、 可 降解性等优势适用于生物医学应用， 可用作纳米抗癌药物载体。 [0003]葡萄糖氧化酶(GOx)是生物体和细胞内常见的氧化酶， 可以将细胞内的葡萄糖氧 化为葡萄糖酸和过氧化氢， GOx含量过多时， 会大量消耗细胞内葡萄糖， 使细胞缺乏营养物 质， 导致饥饿死亡。 目前研究发现， 许多 金属纳米颗粒在生物体内被发现有着与生物酶相同 的催化效果， 金纳米颗粒有着与GOx相同的氧化特性， 这类金属纳米颗粒称作纳米酶。 金纳 米颗粒同时具有良好的光热转换性能和特定的细胞毒性， 可以促进细胞凋亡。 MOFs有很多 和酶可以相互结合的位点， 其对酶的固定在抗癌领域是一个重要的应用， 酶的固定化增强 了酶的结构稳定性、 生物相容 性和酶的活性。 [0004]近年来， 构建酶 ‑MOFs载药平台是抗癌药物载体研究的热题， MOFs主要通过表面固 定、 孔封装和内封装法将酶装载到M OFs平台上， 绝大对 数MOFs封装酶， 只封装一种酶或使用 多种封装方法来封装生物酶和纳米酶。 采用表面生长法将纳米酶负载到MOFs上时， 纳米酶 本身易团聚， 由于之 间相互强电子吸引力造成尺 寸生长， 容易产生纳米酶尺寸不均一， 纳米 酶尺寸过度生长而从MOFs载体脱落， 造成封装酶效率低， 而孔封装和内部封装受到酶尺寸 和金属有机框架尺寸及孔径大小的限制， 而且操作较为复杂， 其一直限制着MOFs基平台负 载生物酶和纳米酶在纳米药物递送方面的应用， 因此， 研究发现一种新的方法通过表面负 载使MOFs可负载多种酶是需要解决的问题。 [0005]目前缺少将生物酶和纳 米酶同时负 载到MOFs表面上的方法， 也没有将其用于癌症 治疗的技 术研究。 发明内容 [0006]针对现有MOFs负载金纳 米颗粒存在的尺寸分布不均和金纳米颗粒易团聚的问题，说　明　书 1/4 页 3 CN 115089730 A 3