ICS 65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3060.5—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第5部分：抗根腐病 Code of practice for evaluation of barley varieties for resistance to disease- Part5:Commonrootrot 行业标准信息服务平台 2016-12-23发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T3060.5—2016 前言 NY/T3060《大麦品种抗病性鉴定技术规程》分为8个部分： 第1部分：抗条纹病； 第2部分：抗白粉病； 第3部分：抗赤霉病； 第4部分：抗黄花叶病； 第5部分：抗根腐病； 第6部分：抗黄矮病； 第7部分：抗网斑病； 第8部分：抗条锈病。 本部分为NY/T3060的第5部分。 本部分由农业部种子管理局提出并归口 本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所、全国农业技术推广服务中心、黑龙江省农业科 学院作物研究所 本部分主要起草人：葡瑞明、邱军、冯晶、王凤涛、刁艳玲、孙丹、陈万权、徐世昌。 行业标准信息服务平台 NY/T3060.5—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第5部分：抗根腐病 1范围 本部分规定了大麦根腐病抗病性鉴定的技术方法和抗病性评价标准。 本部分适用于大麦（HordeumvulgareL.）品种对根腐病抗性的田间鉴定和抗病性评价。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 抗病性diseaseresistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致害作用的可遗传的性状。 2. 2 抗病性鉴定identificationofdiseaseresistance 通过相应技术方法和标准鉴别寄主植物对特定侵染性病害的抵抗水平。 2. 3 抗性评价evaluationof resistance 根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的定性描述。 2. 4 致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。 2.5 人工接种artificialinoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体放于植物体适当部位并使之发病的过程。 标准信息服务平 2. 6 接种体inoculum 能够侵染寄主并引起病害的病原体。 2.7 接种悬浮液 suspensionforinoculation 能够使所含接种体悬浮、稀释的溶液。 2.8 黑胚粒blackgermkernel 胚部呈深褐色或黑色的籽粒，包括黑尖粒和黑斑粒。黑尖粒是指因植物病菌侵害使胚部及胚周围 斑块累积超过籽粒表面积1/2以上，或超过腹沟1/2以上的麦粒。 2. 9 普遍率incidence 发病率 NY/T3060.5—2016 发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率，用以表示发病的普遍程度。在本部分中，植物 体单元为叶片或植株。对于籽粒受侵染引起的黑胚病，普遍率以黑胚率表示，即样品中黑胚粒的数量占 样品总粒数的百分率。 2.10 严重度severity 发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或总体积的百分率，亦可用分级法表示，即将发病 的严重程度由轻到重划分出几个级别，分别用一些代表值表示，说明病害发生的严重程度。 2. 11 侵染型infectiontype 用于定性衡量和表示植物抗性水平。 当寄主植物受到侵染后发生 过敏性坏死反应时，划为较低等 为较高级别的侵染型或确定为感病型 病斑。根据大麦叶片病斑 型，用以表示大麦品种抗叶斑病 和4级记载 程度，按0级、1级、2 、3级 2. 12 病情指数 disease 全面考虑发 2. 13 S 鉴别寄主 differential host 航性 A ARC 2. 14 R 根腐病 COI obotrs 齐糯抱菌 us）侵染为害 由麦根腐 部叶花 这此病原草 侵染幼 大麦根部、植株 叶片、穗部和 发育中的种子 原茵 子度过不良环 传播。当幼苗受 境，植物病残体和 带菌种 卫是重要的初 到种传菌源侵染 褐色 株根部、下部叶 鞘和次茎基节间 杨圆开 此合并成 基节间成为褐色 或接近黑色，茎基部的吐病 部和近地 现您 变；该病原菌侵染 出 叶片和叶鞘产生褐色 黄，具有黄色晕圈， 成株期病斑受叶脉限制 胚籽粒，成享 麦幼胚被 粒胚部末端呈深棕色至 黑色，变色部位甚至扩散至 樱基部。 3病原菌接种体制备 3.1病原菌分离和保存 采用常规组织分离法从典型大麦根腐叶斑病病斑的病健交界处剪取小块组织.在PDA固体培养基 上21℃培养2d3d后，挑取组织样品边缘的菌丝转移到PDA培养基上，在相同条件下继续培养约7d 至产抱，经形态学鉴定确认为麦根腐平齐端孢菌（Bsorokiniana）后，进行单孢分离和纯化培养，经过毒 性测定，病原菌长期保存方法参见A.3，培养基制备方法参见A.2。 3.2病原菌毒性鉴定 用于抗性鉴定接种的麦根腐平齐孢菌菌株先进行毒性鉴定。采用由12个大麦品种组成的一套 鉴别寄主，包括：NDB112、垦啤麦11号、10PJ-24、垦啤麦9号、蒙啤麦3号、Tradition、Bowman、垦啤 麦7号、Varunda、Morex、早熟3号和ND5883。 2 NY/T3060.52016 3.3接种体繁殖 3.3.1采用优势菌株进行接种。在接种前需要进行病原物接种体的繁殖，通常采用高梁粒培养基或 PDA平板法扩繁。培养基配制参见A.2。 a）高梁粒培养基扩繁：将纯化的菌株接种到500mL三角瓶中的高梁粒培养基上扩大培养，经常 摇动三角瓶，防止高粱粒结集。待高梁粒表面长满菌丝后，用自来水漂洗去表面菌丝，去除多 余水分，表面盖上两层纱布，置于室温自然光照条件下继续培养。经常喷水保持纱布湿润，促 进产孢。待大量产孢后用自来水洗下孢子，制成孢子悬浮液。 b）PDA平板法扩繁：在室温（25℃）自然光照条件下，将备用的纯化菌株接种到PDA培养基上培 养，5d～7d后，PDA培养基表面产生大量分生孢子，用少量自来水洗下，经双层纱布过滤后收 集分生孢子，配制孢子悬浮液。 3.3.2接种体悬浮液即孢子悬浮液浓度调至10×10倍显微镜下每个视野平均孢子个数为3个～4个 (1.0X10+个/mL）至14个~15个（5.0X10个/mL），含0.025%Tween-20。 4 田间抗病性鉴定 田间抗病性鉴定在鉴定圃内进行。 4.1鉴定病圃选址 鉴定圃设置在大麦根腐病常发区，具备良好自然发病环境和可控灌溉条件、地势平坦，土壤肥沃的 地块。 4.2对照品种选择 鉴定时选用当地高感品种或ND5883作为感病对照品种，NDB112作为抗病对照品种。ND5883 和NDB112的相关信息参见附录B。 4.3田间配置及种植方式 每个鉴定品种播种3行，顺序排列，3次重复，每次重复设1组抗病和感病对照品种。 鉴定圃采用条播、等行距配置方式。哇宽0.5m，哇宽2.0m，睦长视地形、地势而定；垂直于睦 种植鉴定材料，行长2.0m，行距0.3m.鉴定圃四周种植3行当地品种做保护行。 5 田间播种及管理 5.1播种时期及播种量 播种时间与大田生产品种播种时间一致或适当调整不同品种的播期，使接种期和发病期具有较适 宜的湿度与温度等气象条件。人工开沟播种，每行按照常规播种量播种。冬性和春性品种按当地生产 5.2田间管理 按当地生产水平或田间试验要求及时灌水、追肥、中耕除草和害虫防治。鉴定期间不施用任何杀菌剂。 6接种 6.1接种时期 对于根腐病在苗期根系和茎基部的危害鉴定，在播种时将菌种一同撒人垄沟中，对于由根腐病菌引 起的叶斑病和黑胚病鉴定，应在大麦抽穗期，选择在无风、凉爽（18℃～21℃）、晴朗的下午或傍晚进行人 工接种。 6.2接种方法 6.2.1苗期田间接种 播种时将长满病原菌菌丝的高梁粒随同种子一起均匀撒播在沟中，每延长米施用5.0g，垄沟深 3 NY/T3060.5—2016 度5.0cm~6.0cm，以保证接种效果和增加病害严重度。 6.2.2成株期田间接种 采用叶面喷雾接种鉴定方法，即将孢子悬浮液均匀喷洒到鉴定品种叶片表面，接种后覆盖塑料薄膜 保湿过夜，第2d上午及时打开塑料薄膜，以防高温对大麦植株造成伤害。 6.3接种前后的田间管理 接种前6d～7d先进行田间灌溉或在雨后及时接种。接种后应浇灌，保持土壤潮湿，以满足病害发 生所需湿度条件。 7病情调查 7.1调查时间 在大麦三叶期调查大麦根部病害；在大麦抽穗期叶部喷雾接种10d左右，待感病对照品种充分发 病（严重度达到60%以上）时开始调查叶斑病，间隔7d调查第2次，记载侵染型和严重度；在大麦成熟 脱粒后，取样调查大麦黑胚病。 7.2调查方法及项目 调查时观测记载每个鉴定品种和对照品种的发病状况，根据病害症状描述，分别按根、叶、籽粒调查 记载其病情级别。 调查大麦根腐病的根部病害严重度时，每份材料随机抽样20株，调查记载每株根系的病情级别；调 查叶斑病时，每份材料随机抽样50株，调查每株旗叶和倒数第2和第3叶片的病情级别；成熟后脱粒调 查每份材料的黑胚率，即取3次重复的平均数，每次重复计数500粒，计算黑胚率。分别计算平均严重 度或病情指数。 7.3病情分级 7.3.1根腐病严重度记载及标准 苗期根腐病是根据病害对大麦根系造成坏死症状的严重程度用分级法表示。严重度划分级别和标 准及相应的症状描述分别见表1。根据各级严重度的症状描述，判断严重度的级别。根腐病平均严重 度按式(1)计算。 行业标准信息 (XXS) (1) 式中： S 平均严重度： i 病级数（0~n)； X, i