ICS65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3060.8—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第8部分：抗条锈病 Code of practice for evaluation of barley varieties for resistance to disease- Part8:Stripe rust 行业标准信息服务平台 2016-12-23发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3060.8—2016 前言 NY/T3060《大麦品种抗病性鉴定技术规程》分为8个部分： 第1部分：抗条纹病； 第2部分：抗白粉病； 一第3部分：抗赤霉病； 一第4部分：抗黄花叶病； 一第5部分：抗根腐病； 第6部分：抗黄矮病； 第7部分：抗网斑病； 第8部分：抗条锈病。 本部分为NY/T3060的第8部分。 本部分由农业部种子管理局提出并归口。 本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所、全国农业技术推广服务中心、西藏自治区农牧 科学院、西藏大学。 本部分主要起草人：王凤涛、蔺瑞明、邱军、冯晶、强小林、王文峰、王翠玲、彭岳林、陈万权、徐世昌。 行业标准信息服务平台 I NY/T3060.8—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第8部分：抗条锈病 1范围 本部分规定了大麦条锈病抗病性鉴定的技术方法和抗病性评价标准。 本部分适用于大麦（Hordeumvulgare 品种对条锈病抗性的田间鉴定和抗病性评价。 术语和定义 2 下列术语和定 义适用于 2. 1 RESE 抗病性 disease resistane 植物体所具有的能够减轻或克服原物致病 谁用的可遗传的性状 S 2. 2 慢锈性 在适于病害发生的环境条件 下寄主植物和病原装 感病反 作用表现亲和白的 应但田间病害发展 RCH 速度相对较慢 终期病情指数低 30% 2.3 抗病性鉴定 identification of disease res tance 通过相应技术方 和标准鉴别寄主植物对生 2. 4 U 致病性 pathogenicity 病原物侵染 2.5 人工接种 在适宜条件下通过大工操 种体施加于植物体适当部位手 的过程。 2. 6 病情级别 disease rating scale 人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。 2. 7 M 抗性评价 evaluation of resistance 2.8 分离物isolate 采用人工方法从植物发病部位分离获得的病原物。 2. 9 接种体inoculum 能够侵染寄主并引发病害而表现出病症的病原体 2. 10 NY/T3060.8-2016 接种悬浮液 suspension 由一定量接种体配制成的悬浮水溶液。 2. 11 生理小种physiologicalrace 病原菌种变种或专化型内的分类单位。各生理小种之间形态上无差异，但对具有不同抗病基因的 鉴别品种的致病力存在差异。 2. 12 鉴别寄主 differential host 用于鉴定和区分特定病原菌生理小种或菌系的一套带有不同抗性基因的寄主品种。 2. 13 普遍率incidence 发病率 发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率，用以表示发病的普遍程度。在本部分中植物 体单元为叶片。 2. 14 严重度severity 发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或体积的百分率。严重度用分级法表示，即将发 病的严重程度由轻到重划分出几个级别，分别用各级的代表值或百分率表示，说明病害发生的严重 程度。 2. 15 病情指数diseaseindex 全面考虑发病率与严重度两者的综合指标。 2. 16 侵染型 infectiontype 根据条锈菌侵染大麦品种后有无细胞过敏性坏死反应、条锈菌夏孢子堆大小及夏孢子新鲜程度划 分的反应级别，用以表示大麦青稞品种抗条锈病程度。 2.17 潜育期latent period 病菌与大麦建立寄生关系后到表现症状之前的时期。 2. 18 大麦条锈病barleystriperust 由大麦条锈病菌PucciniastriiformisWest.I.sp.hordeiEriks引起的大麦真菌病害。当地残存 和随气流远距离传播而来的夏孢子是大麦条锈病初侵染源。主要症状：夏孢子堆呈黄色，主要发生在叶 片，偶尔发生在穗部。多个夏孢子堆在成株的叶脉间呈直线排列，其长度逐步延伸，最后可扩展到整个 3病原物接种体制备 3.1条锈菌分离 从发病植株叶片的典型病斑上刮取条锈菌孢子堆中的夏孢子，涂抹于盆播感病品种一叶期幼苗叶 片上。9℃~13℃保湿18h～24h之后，置于15℃~18℃温室内生长发病，获得条锈病初繁菌源。经形 态学鉴定确认为P.striiformisWest.f.sp.hordeiEriks后，进行单孢分离纯化、扩繁，保存备用。 3.2条锈菌生理小种鉴定 2 NY/T3060.8—2016 对用于抗性鉴定接种的条锈菌生理小种先进行小种鉴定。生理小种鉴定采用Topper、HeilsFran ken、Emir、Astrix、Hiproly、Varunda、AbedBinder12、Trumpf、Mazurka、Bigo、I5和Bancroft12个品种 作为鉴别寄主。根据条锈菌与鉴别寄主相互作用产生的抗病或感病模式，确定不同菌株所属的生理 小种。 3.3条锈菌生理小种繁殖 3.3.1繁菌苗种植 养6d~8d，待一叶期接菌。 3.3.2接种和保湿 接种在接种间（9℃～13℃）内进行。首先，用喷雾法净化接种间空气，再用75%乙醇水溶液对操作 台、接种针和手进行消毒。菌种繁殖分为初繁和扩繁。在初繁前，应对供试菌系用鉴别寄主（参见附录 A)进行小种鉴定。 3.3.2.1初繁 待繁菌苗第1叶片全部展开后，从液氮中取出菌种（夏孢子），在40℃～45℃温水中活化5min，之 后置于盛有湿润滤纸的培养血中于8℃～10℃下黑暗水化10h~12h。 采用涂抹法接种，即先用手指蘸清水（自来水）轻轻脱除叶片表面蜡质，再用接种针将条锈菌夏孢子 轻涂于叶片正面。接种后用清水喷雾，使叶片表面附着一层均匀的雾滴，置于接种桶内，密封，于9℃～ 13℃的接种间内黑暗保湿18h～24h。 3.3.2.2扩繁 3.3.2.2.1扩繁可采用扫抹法、喷（撒）粉法和喷雾法接种。具体如下： 扫抹法：先将一叶期的接菌苗置于接种桶内，叶片均匀喷施0.05%Tween-20水溶液，然后将 a) 待用的菌种（夏孢子）直接扫抹于接菌苗叶片上，再均匀喷施0.05%Tween-20水溶液，使叶 片表面附着一层均匀的雾滴，密封，置于9℃～13℃的接种间内黑暗保湿24h。 b）喷（撒）粉法：小喷粉器（或用双层纱布封口的玻璃试管）经消毒、干燥后.加人适当的滑石粉，再 加入少量新采集的条锈菌夏孢子混合均匀待用。滑石粉与夏孢子比例为（20～30）：1。接种 前，先用0.05%Tween-20水溶液叶面喷酒，随后用喷粉器（或用双层纱布封口的玻璃试管） 将上述稀释的孢子粉均匀喷洒或抖落在叶片上，再用0.05%Tween-20水溶液喷雾，使叶片 表面附着一层均匀的雾滴，密封，置于9℃～13℃的接种间内黑暗保湿24h。 喷雾法：用小型喷雾器将新配制好的孢子悬浮液均匀喷洒在叶片上，密封，置于9℃～13℃的 接种间内黑暗保湿24h。V 3.3.2.2.2孢子悬浮液配制方法：在小烧杯里加人接种的条锈菌夏孢子，先用少量的0.05%Tween 20水溶液湿润并搅成糊状，再按照1：1000（g/L)比例加入0.05%Tween-20水溶液。 3.3.3潜育发病 取出接种苗.置于可控温度的温室内潜育发病。温室温度：昼15℃～19℃/夜10℃~14℃；光照强 度：60001x~100001x；光照时间：16h。待叶片现斑时（接种条锈菌后约7d），剪去心叶，加玻璃罩隔离 保纯。接种后15d~17d，夏孢子即可成熟，待用。 3.3.4菌种收集 用喷雾法喷雾净化采菌室空气中可能存在的条锈菌夏孢子。备好喷雾器、接种针、75%乙醇水溶 苗轻轻取至采菌室（不要震动），将产孢幼苗小心横放，用接种针轻轻抖动叶片，使菌种（夏孢子）散落到 玻璃罩内，移去麦苗，再轻敲玻璃罩，将夏抱子集中，装管。 3.3.5菌种保藏 3 NY/T3060.8—2016 3.3.5.1短期保藏 菌种（夏孢子）在5d～6d内使用时，可进行短期保藏。即将采菌试管置于盛有变色硅胶的干燥器 内，置于0℃~5℃冰箱中，待用 3.3.5.2长期保藏 当菌种（夏孢子）准备在第2年或更长时间使用时，需进行长期保藏。长期保藏将采集的孢子置于 盛有变色硅胶的干燥器内，放在0℃～5℃冰箱中干燥3d~5d，移至安培管中，抽真空后封管，置于 一20℃冰箱内，或不需真空抽气直接封管置于液氮中，待用 4田间抗性鉴定 田间抗性鉴定在鉴定圃内进行 PUBLI IS 4.1鉴定圃选址 鉴定圃设在大麦条 溉条件、地势平坦、土壤肥沃的 锈病常 区 地块。 4.2感病对照品种和诱发行品种选择 RESE 鉴定时，感病对照品种和诱 行品种拍选用高感品种，如藏清 25 4.3鉴定圃田间设置及播种 S 4.3.1田间设置 ，等行距配置方式唯宽0m，哇的长度视地形、地势而 采用哇种 种植1行高感品 条播 秀发T0 2m处种植鉴定品种，行向 与诱发行垂直行长1.5 n.行距0.30m， 种作为诱发行 距诱 鉴定面四周 设3次重复 设3行保护区。 4.3.2播种 U 4.3.2.1播种时间 播种时间与大 田生卜 品种播种时间一致或适当调整 整播期：以使值株接种期利 度相 气候条件（湿度 冬性品